來源與形態(tài)：該亞株源自 CHO-K1 細胞系，經(jīng)單細胞克隆或基因編輯技術篩選獲得。體外培養(yǎng)時呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長，細胞呈多邊形，排列緊密且邊界清晰，較母系細胞形態(tài)更均一。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)條件下，增殖穩(wěn)定，傳代周期約 2-3 天，可適應貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)基體系，高密度培養(yǎng)時細胞狀態(tài)仍能保持穩(wěn)定。

遺傳特征：核型為非整倍體，染色體數(shù)目約 20-22 條，核型穩(wěn)定性優(yōu)于母系細胞，基因組背景清晰，無內(nèi)源性病毒序列。部分亞株通過基因改造，缺失了特定代謝相關基因或引入抗性標記，更便于外源基因的篩選與穩(wěn)定表達，長期傳代后仍能維持目標蛋白的表達穩(wěn)定性。

優(yōu)勢：遺傳穩(wěn)定性高，實驗重復性好，能保證長期研究結果的一致性；蛋白表達效率優(yōu)異，翻譯后修飾能力強，產(chǎn)物活性接近天然蛋白；培養(yǎng)適應性強，可在多種培養(yǎng)體系中生長，易于工業(yè)化放大；被國際監(jiān)管機構認可，是生物藥生產(chǎn)的合規(guī)細胞系，應用范圍廣泛。

局限性：部分亞株對特定營養(yǎng)成分有特殊需求，增加了培養(yǎng)成本；長期懸浮培養(yǎng)可能出現(xiàn)細胞聚集體，影響蛋白產(chǎn)量與質(zhì)量；對于某些結構異常復雜的蛋白，表達量可能較低，需進一步優(yōu)化培養(yǎng)條件或進行細胞改造。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素預防污染。若用于大規(guī)模生產(chǎn)，可采用無血清懸浮培養(yǎng)基，并根據(jù)亞株特性調(diào)整營養(yǎng)成分。培養(yǎng)過程中需控制細胞密度，貼壁培養(yǎng)時融合度不宜超過 85%，懸浮培養(yǎng)時密度保持在適宜范圍，避免過度密集影響細胞狀態(tài)。

污染防控：需定期檢測支原體、細菌等污染，可采用 PCR 或染色法進行監(jiān)測。凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液，在液氮中長期保存，復蘇時 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO 以減少細胞損傷，復蘇后建議傳代 1-2 次，待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實驗。