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詳細介紹
來源與形態:該細胞系源自 BHK21 敘利亞倉鼠腎細胞,經單細胞克隆技術篩選得到,“XF-C02" 為其克隆標識,確保細胞群體的遺傳一致性。體外培養呈典型上皮樣形態,貼壁生長,細胞呈多邊形,輪廓清晰,排列較母系細胞更疏松,便于病毒感染時的擴散。在 37℃、5% CO?條件下,增殖穩健,傳代周期約 20-26 小時,可適應 MEM、DMEM 等多種培養基,兼容 10% 胎牛血清或無血清體系,高密度培養(細胞密度達 2.5×10?個 /mL)時仍能保持 85% 以上活性,適合多樣化培養需求。
遺傳特征:核型為近二倍體,染色體數目與敘利亞倉鼠正常核型一致,長期傳代(>60 代)后核型變異率<3%,遺傳穩定性優于多數 BHK21 亞株。其顯著特點是細胞膜表面病毒受體表達廣譜,且內吞途徑活躍,能為不同科屬病毒提供適宜的復制微環境,尤其對包膜病毒的吸附效率突出。
多病毒共培養與交叉反應研究
疫苗生產與工藝優化
病毒載體構建與基因遞送研究
優勢:病毒適應譜廣,可支持 10 余種常見動物病毒的高效復制,減少實驗中細胞系的更換成本;培養耐受性強,對培養基成分波動、pH 變化的適應范圍更廣,降低規模化生產的工藝控制難度;遺傳穩定性優異,長期傳代后病毒敏感性衰減緩慢,適合長期實驗項目;被多國藥監部門認可用于疫苗生產, regulatory 兼容性好。
局限性:部分病毒的復制效率略低于專門優化的亞株(如對狂犬病病毒的滴度稍遜于 C13 亞株);貼壁依賴性較強,懸浮馴化需更長時間(通常 2-3 周);無血清培養時細胞形態易發生輕微改變,需針對性優化營養配方。
培養條件:基礎培養基推薦含 10% 胎牛血清的 MEM,添加丙酮酸以增強代謝活性,同時加入抑菌成分預防污染。傳代時融合度控制在 60%-75%,避免過度密集導致細胞間連接過強,影響病毒擴散。病毒培養階段可調整血清濃度至 2%-5%,平衡細胞活性與病毒釋放效率。
污染防控:定期通過熒光染色檢測支原體,每 20 代進行 STR 鑒定確保遺傳純度;凍存液采用含 10% DMSO 的wan全培養基,液氮保存可維持活性 6 年以上,復蘇時 37℃水浴快速解凍,傳代 2 次后再用于病毒實驗,確保細胞功能穩定。
BHK21-XF-C02 細胞系的獨du特jia值在于其功能的廣譜性與穩定性,為多病毒研究與復雜生產工藝提供了可靠工具。在基礎研究領域,其助力闡明不同病毒的復制差異機制,為跨病毒科比較研究提供標準化平臺;在應用領域,其靈活的培養適應性降低了疫苗生產的工藝門檻,尤其適合中小型生物制品企業的技術轉化。隨著培養工藝的優化(如微載體懸浮培養),該細胞系的應用場景將進一步拓展,持續為生物制藥領域提供支撐。
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