來源與構建：該細胞系以 CHO-K1 細胞為親本，通過慢病毒載體介導將人 5-HT1B 受體基因導入細胞基因組，經嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得穩定株，“5-HT1B" 明確標識其表達的靶受體，與普通 CHO 細胞形成功能區分。構建過程中采用 EF1α 啟動子驅動表達，結合信號肽優化序列，顯著提升受體膜定位效率，確保 90% 以上的 5-HT1B 受體定位于細胞膜表面。

形態與增殖：體外培養呈典型上皮樣形態，貼壁生長，細胞呈多邊形，排列規則，邊界清晰，核質比正常。在 37℃、5% CO?條件下，增殖穩定，傳代周期約 24-30 小時，可適應含 10% 胎牛血清的 F12K 培養基，無需特殊營養因子，傳代 50 次以上仍能維持 5-HT1B 受體高表達（表達量為親本細胞的 30-50 倍），受體活性無明顯衰減。

表達特征：5-HT1B 受體為 G 蛋白偶聯受體（GPCR），膜表達量達（2.0-2.5）×10?分子 / 細胞（流式細胞術檢測），對 5-HT 的親和力高（解離常數 Kd≈3×10?? M），激活后可有效抑制腺苷酸環化酶活性，降低胞內 cAMP 水平（5-HT 刺激后 cAMP 濃度下降 60%-70%），并激活 MAPK/ERK 通路，功能活性接近人腦組織來源的天然受體。

優勢：5-HT1B 受體表達穩定，長期傳代后功能活性波動＜10%，實驗重復性優于原代神經細胞；遺傳背景清晰，與 CHO-K1 細胞同源性高，便于通過親本對照排除非特異性效應；僅表達 5-HT1B 單一受體亞型，無內源性 5-HT 受體干擾，實驗結果特異性強；培養條件簡單，可實現大規模擴增，適合高通量藥物篩選。

局限性：作為非神經來源細胞，缺乏神經元te有的胞內環境，可能影響部分受體調控機制（如與神經元特異性蛋白的相互作用）；受體信號通路的物種差異（倉鼠 vs 人類）可能導致部分藥物的活性評估存在偏差，需結合人源神經細胞驗證；高表達受體可能導致配體敏感性過高，實驗需嚴格控制藥物濃度。

培養條件：常規使用含 10% 胎牛血清的 F12K 培養基，添加 2μg/mL 嘌呤霉素維持抗性篩選，37℃、5% CO?培養箱中生長良好。傳代時控制融合度在 70%-80%，采用溫和消化方法分離細胞，避免機械損傷影響受體膜定位。進行功能實驗前，建議用無血清培養基饑餓處理 16-24 小時，減少血清成分對 GPCR 信號的干擾。

質控與安全：定期通過流式細胞術檢測受體膜表達量，放射性配體結合實驗驗證親和力，確保受體功能穩定；STR 鑒定排除交叉污染，支原體檢測陰性。凍存使用含 10% DMSO 的wan全培養基，液氮保存可維持活性 5 年以上，復蘇后傳代 2 次即可用于實驗。