RNLEC/HL-039大鼠正常肺上皮細胞系
RNLEC/HL-039大鼠正常肺上皮細胞系作為源自大鼠肺組織的上皮細胞模型，因保留肺上皮細胞的氣體交換輔助功能、屏障保護作用及損傷應答特性，在肺部生理功能調控、肺損傷機制及呼吸系統疾病研究中具有重要價值，成為探究肺上皮細胞生物學特性及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠肺實質的支氣管及肺泡上皮組織，經原代培養和純化獲得。細胞形態呈典型上皮樣，多為立方形或多邊形，胞體大小均勻（直徑約 18-22μm），胞質豐富且呈嗜酸性，可見大量的線粒體和內質網，約 15% 細胞可見細小的胞質突起，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層鋪路石樣排列，具有明顯的接觸抑制現象，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數符合正常肺上皮細胞特征：倍增時間約 62 小時，連續傳代 20 次后仍保持穩定的生物學特性；表面標志物表達du特，細胞角蛋白 18（CK18）陽性率達 95%，肺上皮特異性標志物甲狀腺轉錄因子 - 1（TTF-1）陽性率 93%，緊密連接蛋白 occludin 陽性率 91%；具有正常的二倍體核型（染色體數 42 條），無染色體畸變；屏障功能顯著，跨上皮電阻（TEER）值達 380Ω?cm2，對氧氣的通透性達適宜生理范圍；分泌功能活躍，表面活性物質相關蛋白 A（SP-A）基礎分泌量達 30ng/mL，黏液蛋白（MUC5B）分泌量達 22ng/mL；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在肺部氣體交換輔助研究中，RNLEC/HL-039 細胞經低氧（5% 氧氣）處理 48 小時后，缺氧誘導因子 - 1α（HIF-1α）表達量增加 4.2 倍，血管內皮生長因子（VEGF）分泌量提升 55%，可模擬缺氧狀態下肺上皮細胞對血管生成的調控過程，為解析肺部氣體交換的輔助調節機制提供理想模型。
肺損傷修復研究方面，該細胞經脂多糖（LPS）處理后，炎癥因子 IL-6 分泌量增加 4.8 倍，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量提升 60%，細胞凋亡率達 38%；而經肺表面活性物質處理后，細胞存活率提升 50%，炎癥因子水平下降 55%，可模擬細菌性肺炎引起的肺上皮損傷及修復過程，適用于探究肺損傷修復的分子機制。
呼吸系統疾病研究領域，該細胞經二氧化硅顆粒（50μg/mL）處理后，氧化應激水平提升 65%，轉化生長因子 -β1（TGF-β1）表達量增加 4.5 倍，細胞外基質蛋白分泌量提升 40%，能很好地模擬塵肺形成過程中的肺上皮細胞損傷，為探究塵肺等間質性肺病的發病機制提供實驗基礎。此外，該細胞與肺巨噬細胞共培養時，巨噬細胞的吞噬活性提升 45%，炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 3.2 倍，可用于探究肺上皮細胞與免疫細胞相互作用在肺部炎癥中的調控機制。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基，添加 2mM 谷an酰胺、0.1ng/mL 表皮生長因子（EGF）及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次，以維持細胞的正常功能。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用上皮細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導致功能下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調整為 3×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 86% 以上，3-4 代內可恢復正常的生長和功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物且排列規則后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁更換培養條件，以防影響其屏障功能和分泌活性。
RNLEC/HL-039 大鼠正常肺上皮細胞系以其穩定的肺上皮特性、完整的生理功能及典型的損傷應答能力，在肺部生物學研究與呼吸系統疾病機制探索中發揮著重要作用，為揭示肺部疾病的發病機制和開發肺保護藥物提供了可靠的細胞模型。
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