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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1350CHO-E0中國倉鼠卵巢細胞株細胞系

CHO-E0中國倉鼠卵巢細胞株細胞系
產品型號:BY-1350
簡要描述:

CHO-E0中國倉鼠卵巢細胞株細胞系,上皮樣,貼壁或懸浮生長,遺傳穩定,蛋白表達高效且適配性強,適用于基礎研究、重組蛋白生產及藥物開發工藝優化,應用前景廣泛。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

CHO-E0中國倉鼠卵巢細胞株細胞系
CHO-E0中國倉鼠卵巢細胞株細胞系是 CHO 細胞家族中經篩選馴化獲得的通用型亞型,因遺傳背景穩定、蛋白表達適配性強且培養成本可控,成為基礎研究、重組蛋白生產及藥物開發工藝優化的多功能細胞模型。其保留 CHO 細胞典型的上皮樣形態與生長特性,同時通過自然篩選增強了對不同表達載體的兼容性,為生物制藥研發的全流程提供了穩定可靠的細胞平臺。
一、細胞來源與基本特性
  • 來源與馴化:該細胞系源自 CHO-K1 細胞,通過多輪非選擇性傳代與適應性培養獲得:初期以廣譜表達能力為指標,篩選能穩定表達多種外源蛋白(如細胞因子、抗體片段)的克?。缓罄m經含血清與無血清培養基雙向適應,增強培養模式的靈活性,最終獲得 CHO-E0 株系。“E0" 代表其作為 “基礎型(E)零改造(0)" 細胞的特性,標識其未引入外源基因改造的通用屬性。

  • 形態與增殖:體外培養呈典型上皮樣形態,貼壁生長時呈多角形,排列規則;懸浮培養形成直徑 20-60μm 的松散聚集體,細胞圓潤飽滿,活力長期維持在 93% 以上。37℃、5% CO?條件下,增殖周期約 26-32 小時,兼容含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基與多種無血清化學限定培養基,傳代 150 次以上仍保持穩定生長速率,外源蛋白表達量波動<10%,凍存復蘇后存活率超 90%。

  • 表達特征:該細胞系的核心優勢在于廣譜適配性:轉染不同類型表達載體(如質粒、病毒載體)后,重組蛋白表達量可達 2-5g/L(流加培養),尤其對難表達蛋白(如膜蛋白、多亞基復合體)的適配性突出。以 G 蛋白偶聯受體(GPCR)表達為例,其膜定位率達 85% 以上,比普通 CHO-K1 提升 20%,且受體配體結合活性保留率超 90%,為功能研究提供高質量樣本。

二、核心應用領域
  1. 基礎研究模型構建

該細胞系是基因功能驗證與信號通路研究的理想工具。在蛋白互作研究中,通過共轉染目標蛋白與熒光標記載體,可清晰觀察蛋白在細胞內的共定位(如通過 FRET 技術檢測激酶與底物的相互作用);在信號通路解析中,其對多種刺激(如細胞因子、小分子化合物)的響應穩定,可量化分析 MAPK、PI3K 等通路的激活強度(Western blot 檢測磷酸化水平差異),實驗重復性達 90% 以上。
  1. 重組蛋白生產

作為通用型生產基質,其適用于多種重組蛋白的中試生產。生產重組ren干擾素 -α 時,表達量達 3.2g/L,抗病毒活性達 1.8×10? IU/mg;生產單域抗體(VHH)時,無需復雜純化即可獲得純度 90% 以上的產品,且熱穩定性優異(60℃處理 30 分鐘活性保留 80%)。因培養成本僅為高表達亞型的 60%-70%,尤其適合科研級小批量蛋白生產。
  1. 藥物開發工藝優化

在藥物研發中,該細胞系可用于生產工藝參數的摸索。通過測試不同培養基成分、pH 值與溶氧條件對蛋白表達的影響,可快速確定zuiyou工藝(如發現將谷an酰胺濃度控制在 4mM 時,抗體表達量提升 15%);其對基因編輯工具(如 CRISPR/Cas9)的高耐受性,也使其成為細胞系改造的理想起始材料,可通過敲除唾液酸轉移酶等基因優化蛋白糖型。
三、培養方法
  • 貼壁培養操作

  1. 復蘇:從液氮取出凍存管,37℃水浴 1-2 分鐘解凍,轉移至含 10mL 預熱培養基(DMEM/F12+10% 胎牛血清)的離心管,1000rpm 離心 5 分鐘,重懸后接種至 T75 培養瓶,37℃、5% CO?培養箱靜置培養。

  1. 換液:接種 24 小時后更換培養基,去除未貼壁細胞,此后每 48 小時換液一次,維持培養基 pH 7.2-7.4。

  1. 傳代:當細胞融合度達 80%-90% 時,棄培養基,PBS 清洗 2 次,加入 2mL 0.25% yi酶 - EDTA,37℃孵育 2-3 分鐘,鏡檢細胞脫落后加入 8mL 培養基終止消化,按 1:5 比例傳代至新培養瓶。

  • 懸浮培養操作

種子細胞以 2×10?個 /mL 密度接種至 125mL 搖瓶(工作體積 30mL),使用含 4% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基,搖床轉速 110rpm,37℃、5% CO?培養,每 2-3 天傳代一次,維持細胞密度 1×10?-5×10?個 /mL,逐步降低血清濃度至無血清狀態。
  • 凍存流程:取對數生長期細胞,1000rpm 離心 5 分鐘,用凍存液(70% wan全培養基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO)重懸至 5×10?個 /mL,分裝至凍存管,程序降溫盒 - 80℃過夜,次日轉移至液氮保存,保存期可達 5 年以上。

四、優勢與局限性
  • 優勢:遺傳穩定性優異,長期傳代無明顯表型漂移;對不同表達載體兼容性強,無需針對特定蛋白優化細胞系;培養條件寬松,可在含血清與無血清培養基間靈活切換;成本可控,適合大規?;A研究與工藝開發。

  • 局限性:重組蛋白表達量低于專項改造株(如 CHO-D3b);對部分復雜糖基化蛋白的修飾能力有限;懸浮培養時聚集體大小不均一(10-100μm),需優化攪拌參數。

五、研究意義
CHO-E0 細胞系的建立為生物研究提供了標準化通用平臺,其廣譜適配性與穩定性能滿足從基礎研究到中試生產的多樣化需求。在基礎研究中,其助力構建統一的實驗體系,減少因細胞背景差異導致的結果偏差;在應用領域,其作為工藝開發的 “起始模板",推動了生物制藥生產參數的標準化,同時為低成本重組蛋白生產提供了可行方案,尤其對科研機構與中小企業的早期研發具有重要支撐作用,是連接基礎研究與產業應用的關鍵橋梁。

 以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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