來源與遺傳背景：該細胞系源自 CHO-K1 細胞的天然篩選克隆，區別于 DHFR 缺陷型（DHFR?）細胞，其保留功能性 DHFR 基因，可自主合成四氫ye酸（相關代謝的關鍵中間產物），無需外源性胸苷補充。名稱中 “DHFR+" 直接標識其核心代謝特征 ——DHFR 基因功能正常，這一特性使其在無選擇壓力條件下仍能穩定增殖，避免了 DHFR?細胞對培養基成分的嚴苛依賴。

形態與增殖：體外培養呈典型上皮樣形態，貼壁生長時呈多角形，排列緊密；懸浮培養形成直徑 30-80μm 的聚集體，細胞圓潤飽滿，活力長期維持在 91% 以上。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 28-34 小時，兼容含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基與多種無血清培養基，傳代 100 次以上生長速率衰減＜8%，相關合成能力無明顯下降，凍存復蘇后存活率超 88%。

功能特征：核心優勢在于 DHFR 介導的基因擴增潛力：當攜帶 DHFR 基因與目標基因的表達載體轉染后，在特定抑制劑逐步加壓篩選下，可通過基因共擴增機制使外源基因拷貝數增加 10-100 倍，目標蛋白表達量隨之提升 5-20 倍（ELISA 檢測）。與 DHFR?細胞相比，其無需預先敲除內源性 DHFR，基因編輯步驟簡化 40%，且擴增過程中細胞存活率提高 25%-30%。

基礎培養操作：

基因擴增與篩選：

凍存流程：取對數生長期細胞，1000rpm 離心 5 分鐘，用凍存液（70% wan全培養基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 5×10?個 /mL，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉移至液氮保存，保存期可達 5 年以上，復蘇后需在含特定抑制劑的培養基中恢復 2-3 代以穩定表達。

優勢：無需敲除內源性 DHFR，基因操作簡便；特定抑制劑加壓下細胞存活率高，陽性克隆篩選效率提升 30%；相關代謝通路完整，可用于代謝相關研究；擴增后的表達穩定性優于 DHFR?細胞（傳代 50 次衰減＜15%）。

局限性：基礎表達量低于工程化 CHO 株系；高濃度特定抑制劑（＞1μM）下細胞形態易發生畸變；擴增過程耗時較長（需 6-8 周），快速篩選需求受限。