RNCEC/HL-028大鼠正常結腸上皮細胞系
RNCEC/HL-028大鼠正常結腸上皮細胞系作為源自大鼠結腸黏膜組織的正常上皮細胞模型，因保留結腸上皮的屏障功能及物質吸收特性，在結腸黏膜穩態維持、腸道炎癥機制及結直腸癌變早期研究中具有重要價值，成為探究結腸上皮生理功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠結腸中段黏膜組織，經原代培養和純化獲得。細胞形態呈柱狀，部分呈高柱狀，胞體大小均勻（直徑約 12-16μm，長度約 20-25μm），胞質豐富且呈弱嗜酸性，可見散在的吸收小泡，約 10% 細胞可見刷狀緣結構，細胞核呈橢圓形，位于細胞基底部，核仁不明顯。生長方式為貼壁生長，呈單層有序排列，具有明顯的接觸抑制現象，傳代后 24 小時貼壁率達 93%。核心參數表現出正常結腸上皮細胞特征：倍增時間約 75 小時，連續傳代 16 次后仍保持穩定的生物學特性；表面標志物表達du特，細胞角蛋白 20（CK20）陽性率達 96%，上皮細胞黏附分子（EpCAM）陽性率 95%，緊密連接蛋白 ZO-1 陽性率 94%；具有正常的二倍體核型（染色體數 42 條），無染色體畸變；細胞間連接緊密，跨上皮電阻值達 400Ω?cm2，能有效阻擋大分子物質透過；可吸收葡萄糖和短鏈脂肪酸，葡萄糖轉運速率達 25nmol/(h?mg 蛋白)；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在結腸黏膜屏障功能研究中，RNCEC/HL-028 細胞經脂多糖（LPS）處理 24 小時后，跨上皮電阻值下降 45%，緊密連接蛋白 occludin 表達量減少 40%，炎癥因子 IL-1β 分泌量增加 4.2 倍，可模擬腸道感染時結腸屏障的損傷過程，為解析腸道屏障破壞機制提供理想模型。
在腸道炎癥研究方面，該細胞經腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）處理 48 小時后，凋亡率增加 35%，黏膜修復相關因子 TGF-β1 表達量提升 50%，遷移速率增加 55%，可模擬潰瘍性結腸炎中結腸上皮的損傷與修復過程，適用于探究腸道炎癥的發病機制及評估抗炎藥物療效。
結直腸癌變早期研究領域，該細胞經氧化偶氮甲烷（AOM）處理后，增殖標志物 Ki67 陽性率增加至 42%，抑癌基因 p53 表達量下降 38%，細胞形態出現輕度異型性，能很好地模擬結直腸癌變早期的細胞變化，為篩選結直腸癌早期預警標志物提供實驗基礎。此外，該細胞與腸道菌群共培養時，乳酸桿菌可使細胞的緊密連接蛋白表達量增加 30%，炎癥因子分泌量減少 25%，可用于探究腸道菌群與結腸上皮的相互作用機制。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F-12 培養基，添加 20ng/mL 表皮生長因子（EGF）、1% 胰島素 - 轉鐵蛋白 - 硒混合液及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次，以維持細胞的正常功能。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用細胞解離液，37℃孵育 10-12 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 7-8 天傳代一次，避免過度傳代導致刷狀緣結構減少。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調整為 2×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 85% 以上，3-4 代內可恢復正常的生長和吸收功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁擾動培養瓶，以防影響細胞極性。
RNCEC/HL-028 大鼠正常結腸上皮細胞系以其穩定的結腸上皮特性、完整的屏障功能及正常的物質吸收能力，在結腸生物學研究與腸道疾病機制探索中發揮著重要作用，為揭示腸道疾病的發病機制和開發新型治療藥物提供了可靠的細胞模型。
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