RNBEC/HL-033大鼠正常膀胱上皮細胞系
RNBEC/HL-033大鼠正常膀胱上皮細胞系作為源自大鼠膀胱黏膜的上皮細胞模型，因保留膀胱上皮te有的屏障功能與分泌特性，在膀胱生理功能調控、尿路疾病機制及損傷修復研究中具有重要價值，成為探究膀胱上皮細胞生物學特性及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠膀胱黏膜的移行上皮組織，經原代培養和純化獲得。細胞形態呈典型上皮樣，多為多邊形或立方形，胞體大小均勻（直徑約 18-22μm），胞質豐富且呈嗜酸性，可見大量橋粒結構和中間絲，約 15% 細胞呈現雙核特征，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層 “鋪路石" 樣排列，具有明顯的接觸抑制現象，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數符合正常膀胱上皮細胞特征：倍增時間約 65 小時，連續傳代 20 次后仍保持穩定的生物學特性；表面標志物表達du特，細胞角蛋白 13（CK13）陽性率達 95%，膀胱上皮特異性標志物 uroplakin III 陽性率 93%，緊密連接蛋白 occludin 陽性率 91%；具有正常的二倍體核型（染色體數 42 條），無染色體畸變；屏障功能顯著，跨上皮電阻（TEER）值達 450Ω?cm2，對尿素的通透性僅為 0.25μL/(h?cm2)；分泌功能活躍，黏蛋白（MUC5AC）基礎分泌量達 32ng/mL，防御素 β2 分泌量達 18pg/mL；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在膀胱屏障功能研究中，RNBEC/HL-033 細胞經脂多糖（LPS）處理 48 小時后，緊密連接蛋白 claudin-4 表達量下降 55%，跨上皮電阻值降低 60%，細菌黏附率增加 4.2 倍，可模擬膀胱炎狀態下膀胱上皮屏障的破壞過程，為解析膀胱黏膜防御機制提供理想模型。
膀胱損傷修復研究方面，該細胞經硝suan銀（膀胱損傷誘導劑）處理后，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 4.8 倍，損傷區域面積占比達 38%，增殖相關基因 Ki67 表達量提升 50%；而經表皮生長因子（EGF）處理后，細胞遷移速率增加 60%，損傷修復率提升 45%，可模擬化學性膀胱損傷及修復過程，適用于探究膀胱上皮再生機制。
尿路疾病研究領域，該細胞經高濃度尿液溶質（尿酸鹽結晶 500μmol/L）處理后，炎癥因子 IL-8 分泌量增加 5.2 倍，活性氧（ROS）水平提升 65%，細胞凋亡率達 35%，能很好地模擬膀胱結石引起的上皮損傷，為探究尿路結石相關膀胱炎的發病機制提供實驗基礎。此外，該細胞與膀胱平滑肌細胞共培養時，平滑肌細胞的收縮相關蛋白 MLCK 表達量增加 3 倍，可用于探究上皮 - 平滑肌相互作用在膀胱功能調控中的機制。
培養與保存規范：推薦使用含 15% 胎牛血清的 Keratinocyte-SFM 培養基，添加 0.1ng/mL 表皮生長因子（EGF）、0.5μg/mL 氫化ke的松及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次，以維持細胞的屏障功能和分泌活性。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用上皮細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞邊緣收縮后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導致分化標志物表達下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調整為 3×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 85% 以上，3-4 代內可恢復正常的生長和屏障功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物且排列緊密后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁更換培養溫度，以防影響緊密連接的穩定性。
RNBEC/HL-033 大鼠正常膀胱上皮細胞系以其穩定的膀胱上皮特性、完整的屏障功能及典型的損傷應答能力，在膀胱生物學研究與尿路疾病機制探索中發揮著重要作用，為揭示膀胱疾病的發病機制和開發膀胱保護藥物提供了可靠的細胞模型。
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