來源與克隆背景：該細(xì)胞系源自 20 世紀(jì) 50 年代分離的恒河猴腎原代細(xì)胞，通過有限稀釋法獲得單克隆株（“LLC" 代表原始分離實(shí)驗(yàn)室代號(hào)）。篩選過程以副黏病毒敏感性為核心指標(biāo)，未引入外源基因，全基因組測(cè)序顯示其染色體數(shù)目為 42（恒河猴正常核型），與原代腎上皮細(xì)胞遺傳相似度＞96%，核型穩(wěn)定性在傳代 100 次內(nèi)畸變率＜3%，群體均一性優(yōu)于早期混合株（流式檢測(cè)細(xì)胞周期同步率偏差＜6%）。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈多邊形，胞質(zhì)豐富，細(xì)胞排列緊密呈鋪路石狀；懸浮培養(yǎng)易脫落死亡，故以貼壁培養(yǎng)為主。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 32-36 小時(shí)，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，傳代 80 次以上生長(zhǎng)速率衰減＜12%，凍存復(fù)蘇后存活率超 85%，無血清馴化后細(xì)胞密度可達(dá) 3×10?個(gè) /cm2。

功能特征：核心優(yōu)勢(shì)在于副黏病毒受體高表達(dá)與復(fù)制支持能力：麻疹病毒受體 CD46 表達(dá)量較普通猴腎細(xì)胞高 4 倍（免疫熒光檢測(cè)），腮腺炎病毒受體 SLAM（CD150）陽性率＞95%（流式檢測(cè)）。感染麻疹病毒后 72 小時(shí)，病毒滴度可達(dá) 10?-10? TCID??/mL，較 Vero 細(xì)胞高 1-2 個(gè)數(shù)量級(jí)；感染腮腺炎病毒后 60 小時(shí)，細(xì)胞病變（CPE）率達(dá) 90%，表現(xiàn)為多核巨細(xì)胞形成，顯著特征性優(yōu)于其他細(xì)胞系。

貼壁培養(yǎng)操作：

病毒培養(yǎng)流程：

凍存流程：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，1000rpm 離心 5 分鐘，凍存液（70% MEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 6×10?個(gè) /mL，分裝凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜后移至液氮，保存期超 5 年，復(fù)蘇后傳代 2 次再用于病毒實(shí)驗(yàn)（確保受體表達(dá)穩(wěn)定）。

優(yōu)勢(shì)：對(duì)副黏病毒（尤其麻疹、腮腺炎病毒）敏感性ji高（滴度較普通猴腎細(xì)胞高 1-2 個(gè)數(shù)量級(jí)）；遺傳背景穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好（CV＜7%）；符合 GMP 標(biāo)準(zhǔn)，無內(nèi)源性病毒污染；病毒 CPE 特征典型，易于觀察鑒定；可適應(yīng)無血清培養(yǎng)，便于工業(yè)化生產(chǎn)。

局限性：對(duì)腸道病毒、冠狀病毒敏感性較低；貼壁依賴性強(qiáng)，懸浮培養(yǎng)難度大；長(zhǎng)期傳代（＞100 次）可能出現(xiàn) CD46 受體表達(dá)下調(diào)（約 15%）；缺乏干擾素合成能力，可能影響藥物體內(nèi)外活性相關(guān)性。