產(chǎn)品系統(tǒng)PRODUCT CENTER
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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1458MDCK/IgR犬腎細(xì)胞系


廠家實(shí)力
Manufacturer Strength
有效保修
Valid Warranty
質(zhì)量保障
Quality Assurance產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細(xì)介紹
來源與工程化特征
形態(tài)與生長特征
功能特性
IgR 表達(dá)與抗體結(jié)合:膜表面 IgR 表達(dá)量達(dá) 6.2×10?分子 / 細(xì)胞(野生型 MDCK 幾乎不表達(dá)),可特異性結(jié)合犬 IgG、IgA(結(jié)合率分別為 98%、85%),對(duì)豬源免疫球蛋白的交叉結(jié)合率約 30%;IgR 介導(dǎo)的抗體內(nèi)吞效率是野生型細(xì)胞的 8 倍,轉(zhuǎn)運(yùn)至基底側(cè)的抗體量達(dá)初始濃度的 45%(野生型<5%),模擬黏膜上皮的抗體轉(zhuǎn)運(yùn)過程。
病毒 - 抗體復(fù)合物處理:對(duì)流感病毒 - 抗體復(fù)合物的捕獲效率達(dá) 90%(野生型為 25%),通過 IgR 介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將復(fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi),其中 80% 被靶向溶酶體降解(野生型多通過非特異性途徑清除),顯著增強(qiáng)抗體的病毒清除能力;與野生型相比,病毒 - 抗體復(fù)合物處理后細(xì)胞存活率提升 60%。
屏障功能與受體協(xié)同:形成穩(wěn)定的緊密連接,跨上皮電阻(TEER)值達(dá) 300-330Ω?cm2(略低于野生型),保留野生型的唾液酸受體表達(dá)(SAα2,3/SAα2,6 比例 1:1.1),對(duì)流感病毒的感染效率與野生型一致(99%),但在抗體存在時(shí),病毒復(fù)制量下降至野生型的 1/20,體現(xiàn) IgR 與病毒受體的功能協(xié)同。
黏膜免疫與抗體轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究
IgR 介導(dǎo)的抗體轉(zhuǎn)運(yùn)路徑:利用該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn),IgR 通過與抗體 Fc 段結(jié)合,啟動(dòng)網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞(與野生型的非特異性內(nèi)吞不同),轉(zhuǎn)運(yùn)過程依賴 Rab11 陽性 recycling endosome(敲除后轉(zhuǎn)運(yùn)效率下降 75%),與犬腸道黏膜的抗體轉(zhuǎn)運(yùn)規(guī)律wan全一致(R2=0.93),為口服抗體藥物的設(shè)計(jì)提供依據(jù)。
母源抗體傳遞模擬:在幼犬被動(dòng)免疫研究中,MDCK/IgR 細(xì)胞可模擬母乳抗體經(jīng)腎臟重吸收過程,IgA 經(jīng) IgR 轉(zhuǎn)運(yùn)的效率達(dá) 52%,與幼犬血清中母源抗體水平的相關(guān)性達(dá) 91%(野生型細(xì)胞無法模擬),揭示新生動(dòng)物獲得被動(dòng)免疫的關(guān)鍵機(jī)制。
病毒中和作用與抗體評(píng)價(jià)
抗病毒抗體效能檢測(cè):建立基于 IgR 的抗體中和實(shí)驗(yàn)?zāi)P停晨沽鞲胁《締慰寺】贵w在該細(xì)胞系中表現(xiàn)出的中和效價(jià)是野生型細(xì)胞的 3 倍(EC??=0.05μM),更接近動(dòng)物體內(nèi)保護(hù)效果(相關(guān)性達(dá) 94%),因 IgR 介導(dǎo)的抗體富集作用,可顯著提升低濃度抗體的檢測(cè)靈敏度。
病毒逃逸抗體機(jī)制解析:通過對(duì)比 MDCK/IgR 與野生型細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)某流感病毒變異株可通過改變血凝素構(gòu)象,降低抗體結(jié)合能力,同時(shí)抑制 IgR 介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)清除(效率下降 60%),雙重機(jī)制導(dǎo)致中和逃逸,該發(fā)現(xiàn)為廣譜抗體設(shè)計(jì)提供靶向位點(diǎn)。
抗體藥物開發(fā)與轉(zhuǎn)運(yùn)研究
口服抗體藥物篩選:利用其抗體轉(zhuǎn)運(yùn)功能,篩選出可被 IgR 高效轉(zhuǎn)運(yùn)的抗 PEDV 單克隆抗體(轉(zhuǎn)運(yùn)效率達(dá) 48%),在仔豬口服實(shí)驗(yàn)中,腸道吸收量是普通抗體的 3 倍,對(duì) PEDV 的抑制率達(dá) 85%,解決了抗體藥物口服生物利用度低的問題。
藥物 - 抗體偶聯(lián)物遞送:將抗病du藥物與 IgG 偶聯(lián),通過 MDCK/IgR 細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),藥物在基底側(cè)的釋放量是游離藥物的 10 倍,對(duì)感染細(xì)胞的靶向性顯著提升(IC??下降至 0.1μM),減少對(duì)正常細(xì)胞的毒性。
優(yōu)勢(shì):
功能特異性突出:具備野生型 MDCK 缺乏的 IgR 介導(dǎo)抗體轉(zhuǎn)運(yùn)功能,可模擬天然黏膜的抗體處理過程,為免疫機(jī)制研究提供專屬模型,彌補(bǔ)野生型細(xì)胞在抗體功能研究中的不足。
檢測(cè)靈敏度高:對(duì)病毒 - 抗體復(fù)合物的捕獲與轉(zhuǎn)運(yùn)能力,使抗體中和實(shí)驗(yàn)的靈敏度提升 3-5 倍,尤其適合低親和力抗體的效能評(píng)價(jià),結(jié)果與在體實(shí)驗(yàn)相關(guān)性更高。
與野生型互補(bǔ)性強(qiáng):保留野生型的病毒敏感性與屏障功能,可通過對(duì)比實(shí)驗(yàn)區(qū)分 IgR 依賴與非依賴的生物學(xué)過程,研究設(shè)計(jì)更具科學(xué)性。
局限性:
IgR 種屬特異性:主要表達(dá)犬源 IgR,對(duì)人源或豬源抗體的轉(zhuǎn)運(yùn)效率較低(<30%),需構(gòu)建相應(yīng)種屬的 IgR 表達(dá)細(xì)胞系(如 MDCK/pIgR)。
培養(yǎng)條件復(fù)雜:需持續(xù)添加篩選抗生素,長期培養(yǎng)可能影響細(xì)胞代謝,功能穩(wěn)定性略低于野生型(傳代 150 次后 IgR 表達(dá)下降 10%)。
功能單一性:僅強(qiáng)化抗體轉(zhuǎn)運(yùn)功能,無法模擬其他免疫細(xì)胞的協(xié)同作用,需與免疫細(xì)胞系聯(lián)合使用。
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