MC3T3-E1小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14細胞系
MC3T3-E1小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14細胞系源自 C57BL/6 小鼠顱頂骨的成骨前體細胞，經克隆篩選獲得。作為成骨細胞研究的經典模型，其保留了成骨細胞完整的分化潛能，能模擬體內成骨過程的各個階段，為骨發育、骨代謝及骨疾病研究提供了穩定的實驗工具。
在顯微鏡下，未分化的 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞呈貼壁生長，形態以梭形和多角形為主，細胞排列疏松，宛如散落在培養皿上的 “小紡錘"。隨著分化進程推進，細胞逐漸聚集，形成多層結構，最終分泌礦化基質，呈現典型的成骨結節 —— 這些結節是成骨細胞成熟的標志，通過茜素紅染色可清晰觀察到紅色的礦化沉積。細胞直徑約 15-20 微米，胞質內富含堿性磷酸酶（ALP）—— 這是成骨分化早期的關鍵酶，核呈橢圓形，位于細胞一側，核仁明顯。該細胞增殖速度中等，倍增時間約 48-60 小時，傳代時用 0.25% 胰dan白酶消化 4-6 分鐘，按 1:4-1:6 比例接種，傳代周期穩定，可在體外連續培養多代仍保持成骨分化能力。
培養 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞需兼顧增殖與分化需求。基礎培養基選用 α-MEM，其低鈣離子濃度更適合成骨前體細胞生長；添加 10% 胎牛血清（FBS）提供生長因子，同時需加入 50μg/ml 抗壞血酸和 10mM β- 甘油lin酸鈉 —— 前者促進膠原蛋白合成，后者為礦化提供磷酸根，兩者共同誘導成骨分化。培養環境為 37℃、5% CO?，pH 維持在 7.2-7.4，通過培養基中的酚紅指示劑監測酸堿變化。值得注意的是，該細胞對血清質量敏感，劣質血清會導致分化能力下降，因此需選擇成骨研究專用血清，并在更換批次時進行分化功能驗證。
在成骨分化機制研究中，MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞系是解析成骨過程的核心模型。其分化過程分為三個階段：增殖期（1-7 天）、基質形成期（7-14 天）和礦化期（14-21 天），各階段對應特定基因的時序性表達 —— 早期表達 ALP、Runx2，中期表達骨橋蛋白（OPN），晚期表達骨鈣素（OCN）。科研人員通過檢測這些標志物的表達變化，研究成骨分化的調控網絡。例如，BMP-2 可通過激活 Smad1/5/8 信號通路，上調 Runx2 表達，加速 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞的成骨分化，這一機制為骨缺損修復中 BMP-2 的應用提供了實驗依據。
在骨代謝研究中，該細胞系可模擬成骨細胞與破骨細胞的相互作用。通過構建 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞與 RAW264.7 細胞（可誘導為破骨細胞）的共培養模型，能研究成骨細胞分泌的 RANKL（核因子 κB 受體活化因子配體）對破骨細胞形成的調控 —— 成骨細胞通過調節 RANKL/OPG（骨保護素）比例，維持骨吸收與骨形成的平衡。例如，雌激素缺乏可使 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞中 RANKL 表達增加，誘導破骨細胞活化，模擬骨質疏松癥的骨吸收亢進狀態，為研究激素對骨代謝的影響提供模型。
在骨疾病模型研究中，MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞系可模擬多種骨病的病理特征。在骨質疏松研究中，用糖皮質激素處理細胞，會抑制 ALP 活性和礦化結節形成，模擬激素誘導的成骨功能障礙；在成骨不全研究中，通過 siRNA 沉默 COL1A1 基因，可觀察到膠原蛋白合成減少、礦化異常，模擬疾病中骨基質形成缺陷的狀態。這些模型為探索疾病分子機制提供了體外實驗平臺。
在藥物篩選領域，該細胞系是評估促骨形成藥物的重要工具。通過檢測藥物對 ALP 活性、礦化結節形成及成骨相關基因表達的影響，可篩選有效的候選藥物。例如，中藥成分淫羊藿苷可促進 MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞的礦化，其機制與激活 ERK 信號通路相關，這一發現為骨質疏松癥的中藥治療提供了實驗支持。此外，該細胞系還可用于評估生物材料的骨相容性，將材料浸提液與細胞共培養，通過觀察細胞增殖、分化狀態，判斷材料是否具有成骨誘導活性，為骨修fu材料的研發提供參考。
前沿研究中，MC3T3-E1 亞克隆 14 細胞的應用持續拓展。在 3D 生物打印研究中，將細胞與生物墨水混合打印，可構建具有成骨活性的三維支架，模擬體內骨組織的結構與功能；在單細胞測序研究中，通過解析分化過程中細胞異質性，可發現新的成骨調控因子；在基因編輯研究中，利用 CRISPR 技術敲除負調控成骨的基因（如 DKK1），可顯著增強細胞的成骨能力，為骨再生治療提供基因編輯細胞來源。
以上信息僅供參考，詳細信息請聯系我們。
詳細介紹
產品咨詢
聯系我們
