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首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1452SSC-S4家豬皮膚細(xì)胞系

SSC-S4家豬皮膚細(xì)胞系
產(chǎn)品型號(hào):BY-1452
簡(jiǎn)要描述:

SSC-S4家豬皮膚細(xì)胞系,成纖維樣貼壁生長(zhǎng),高表達(dá)皮膚修復(fù)相關(guān)因子,對(duì)多種皮膚病毒敏感,適用于創(chuàng)傷愈合研究、皮膚病機(jī)制解析及外用藥物篩選。

  • 廠家實(shí)力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細(xì)介紹

SSC-S4家豬皮膚細(xì)胞系
SSC-S4家豬皮膚細(xì)胞系,SSC-S4 細(xì)胞系是從家豬皮膚組織分離建立的成纖維樣細(xì)胞系,因高表達(dá)皮膚修復(fù)相關(guān)因子,對(duì)多種皮膚病毒及創(chuàng)傷修復(fù)信號(hào)分子具有高度敏感性,成為豬皮膚創(chuàng)傷愈合研究、皮膚病機(jī)制解析及外用藥物篩選的核心模型。其與家豬皮膚成纖維細(xì)胞的基因同源性達(dá) 98%,在模擬皮膚再生微環(huán)境、成纖維細(xì)胞活化等方面表現(xiàn)突出,為解析皮膚損傷修復(fù)機(jī)制、開(kāi)發(fā)獸用促愈合藥物提供了專(zhuān)屬平臺(tái),尤其在豬痘病毒感染、燒傷修復(fù)研究中具有不可替代的價(jià)值,與 PK-15 等腎細(xì)胞系形成豬源細(xì)胞研究的組織功能互補(bǔ)體系。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來(lái)源與建立背景

SSC-S4 細(xì)胞系源自 2018 年我國(guó)學(xué)者從 6 月齡健康家豬背部皮膚分離的原代成纖維細(xì)胞,經(jīng)克隆純化獲得永生化株(“SSC" 代表豬皮膚細(xì)胞,“S4" 區(qū)分于其他皮膚細(xì)胞亞型)。該細(xì)胞系因能穩(wěn)定表達(dá)皮膚修復(fù)相關(guān)因子,2020 年被確立為皮膚創(chuàng)傷研究的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系,解決了原代皮膚成纖維細(xì)胞體外活化狀態(tài)易丟失的問(wèn)題,成為首ge能模擬皮膚創(chuàng)傷修復(fù)全過(guò)程的永生化細(xì)胞系。
  1. 形態(tài)與生長(zhǎng)特征

細(xì)胞呈典型成纖維樣形態(tài),貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈長(zhǎng)梭形,排列呈放射狀(與 PK-15 的上皮樣 “鋪路石" 結(jié)構(gòu)差異顯著),胞質(zhì)富含肌動(dòng)蛋白纖維,細(xì)胞核呈橢圓形(核質(zhì)比約 1:5.3),核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,倍增時(shí)間約 42-46 小時(shí)(略長(zhǎng)于 PK-15 的 36-40 小時(shí)),接種密度 1×10?個(gè) /mL 時(shí),72 小時(shí)密度達(dá) 1.5×10?個(gè) /mL(增殖能力稍弱于腎細(xì)胞系)。連續(xù)傳代 160 次后仍保持穩(wěn)定核型(38 條染色體),修復(fù)相關(guān)因子表達(dá)無(wú)顯著下降,適合長(zhǎng)期創(chuàng)傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)。
  1. 功能特性

  • 皮膚修復(fù)標(biāo)志物與生長(zhǎng)因子:高表達(dá)皮膚創(chuàng)傷修復(fù)特異性標(biāo)志物,如 α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA,陽(yáng)性率 96%)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1(TGF-β1,陽(yáng)性率 95%),其 TGF-β1 分泌量達(dá) 45pg/10?細(xì)胞 / 天(是 PK-15 細(xì)胞的 8 倍);分泌成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 2(FGF2)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF),其中 FGF2 含量達(dá) 30pg/10?細(xì)胞 / 天,能顯著促進(jìn)自身及上皮細(xì)胞遷移(遷移速率是靜止期細(xì)胞的 2.3 倍),模擬創(chuàng)傷后成纖維細(xì)胞的活化狀態(tài)。

  • 膠原合成與重塑能力:Ⅰ 型膠原分泌量達(dá) 28μg/10?細(xì)胞 / 天(顯著高于 PK-15 的 5μg),膠原酶活性達(dá) 18U/10?細(xì)胞 / 天,可完成膠原的合成 - 降解動(dòng)態(tài)平衡;在三維凝膠模型中能收縮基質(zhì)(24 小時(shí)收縮率達(dá) 40%),模擬皮膚創(chuàng)傷后的組織重塑過(guò)程,與家豬皮膚創(chuàng)傷愈合的膠原變化規(guī)律一致性達(dá) 90%。

  • 病毒敏感性譜:對(duì)皮膚嗜性病毒(如豬痘病毒)的感染效率達(dá) 98%,感染后 48 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(細(xì)胞變圓、脫落),病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL(是 PK-15 細(xì)胞的 6 倍);因高表達(dá)皮膚病毒受體整合素 αvβ6,對(duì)豬痘病毒、口蹄疫病毒皮膚亞型的吸附效率顯著高于腎細(xì)胞系,尤其適合皮膚病毒病研究。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 皮膚創(chuàng)傷修復(fù)機(jī)制研究

  • 成纖維細(xì)胞活化機(jī)制:通過(guò)該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷后機(jī)械應(yīng)力可激活 YAP/TAZ 通路,使 α-SMA 表達(dá)量提升 3 倍,細(xì)胞收縮力增強(qiáng) 50%,與家豬創(chuàng)傷組織中肌成纖維細(xì)胞的聚集規(guī)律高度吻合(創(chuàng)傷后 7 天陽(yáng)性率達(dá) 65%),揭示物理信號(hào)對(duì)修復(fù)過(guò)程的調(diào)控機(jī)制。

  • 瘢痕形成模型:在 TGF-β1 持續(xù)刺激下,細(xì)胞膠原合成量增加 2 倍,α-SMA 陽(yáng)性率升至 85%,形成類(lèi)似瘢痕組織的致密結(jié)構(gòu),其膠原排列紊亂程度與家豬增生性瘢痕的一致性達(dá) 88%(PK-15 模型無(wú)法模擬),為抗瘢痕藥物研發(fā)提供理想模型。

  1. 皮膚病毒感染與免疫研究

  • 豬痘病毒致皮膚損傷機(jī)制:利用其皮膚特異性,發(fā)現(xiàn)豬痘病毒可通過(guò)抑制 IFN-β 信號(hào)通路(下調(diào) 40%)促進(jìn)自身復(fù)制,同時(shí)誘導(dǎo) IL-6 分泌增加 2 倍,導(dǎo)致皮膚炎癥反應(yīng)加劇,與臨床豬痘病例的皮膚紅腫程度正相關(guān)(R2=0.92),研究結(jié)果較 PK-15 模型更接近在體狀態(tài)。

  • 抗病毒免疫應(yīng)答研究:在病毒感染后,該細(xì)胞系的 TLR3 表達(dá)量上升 3 倍,激活 NF-κB 通路促進(jìn)促炎因子分泌,其免疫應(yīng)答模式與家豬皮膚組織的吻合度達(dá) 85%,顯著優(yōu)于腎細(xì)胞系的免疫反應(yīng)模擬效果。

  1. 外用藥物與創(chuàng)面敷料開(kāi)發(fā)

  • 促愈合藥物篩選:建立基于細(xì)胞遷移與膠原合成的高通量篩選模型,某植物提取物可使 SSC-S4 細(xì)胞的遷移速率提升 40%,Ⅰ 型膠原分泌增加 30%,家豬創(chuàng)傷實(shí)驗(yàn)顯示愈合時(shí)間縮短 25%,證實(shí)該模型的應(yīng)用價(jià)值。

  • 敷料生物相容性評(píng)價(jià):在與膠原蛋白敷料共培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞活性保持率達(dá) 95%,VEGF 分泌量提升 20%,與家豬皮膚創(chuàng)面的貼合度評(píng)價(jià)結(jié)果一致性達(dá) 93%(PK-15 模型僅 60%),被多家獸醫(yī)藥企列為shou選評(píng)價(jià)工具。

三、培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL TGF-β1,pH 維持在 7.2-7.4;為模擬創(chuàng)傷狀態(tài),可添加 10ng/mL 血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF),使細(xì)胞遷移能力提升 25%。

  • 傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 75% 時(shí),按 1:4 比例接種(低于 PK-15 的 1:5 比例),離心速度 1000rpm,24 小時(shí)貼壁率超 92%,避免過(guò)度融合(>85% 會(huì)導(dǎo)致修復(fù)因子分泌下降)。

  • 凍存保護(hù):采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基,細(xì)胞密度 2×10?個(gè) /mL,程序降溫至 - 80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮,復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘,存活率可達(dá) 90%,需檢測(cè) α-SMA 表達(dá)確認(rèn)活化狀態(tài)穩(wěn)定。

  1. 功能實(shí)驗(yàn)操作

  • 創(chuàng)傷修復(fù)模型:細(xì)胞接種 6 孔板形成單層后,劃痕寬度 0.5mm,24 小時(shí)后愈合率達(dá) 55%(顯著高于 PK-15 的 20%),通過(guò) ImageJ 軟件定量分析遷移能力,結(jié)果變異系數(shù)<6%。

  • 病毒感染實(shí)驗(yàn):接種豬痘病毒(MOI=0.1)后,37℃培養(yǎng) 48 小時(shí),通過(guò)免疫熒光檢測(cè)病毒抗原,陽(yáng)性率可達(dá) 98%,需設(shè)置 PK-15 對(duì)照組明確組織特異性差異。

四、優(yōu)勢(shì)與局限性
  • 優(yōu)勢(shì)

  1. 修復(fù)功能特異性突出:是唯yi能穩(wěn)定模擬皮膚創(chuàng)傷修復(fù)全過(guò)程的細(xì)胞系,成纖維細(xì)胞活化與膠原重塑功能顯著優(yōu)于 PK-15 等非皮膚細(xì)胞系,為創(chuàng)傷研究提供專(zhuān)屬模型。

  1. 皮膚病毒敏感性高:對(duì)豬痘病毒等皮膚嗜性病毒的感染效率與復(fù)制支持能力居豬源細(xì)胞系shou位,病毒滴度是腎細(xì)胞系的 5-8 倍,大幅提升皮膚病毒病研究效率。

  1. 藥物評(píng)價(jià)相關(guān)性強(qiáng):與家豬皮膚組織的生理功能一致性達(dá) 90%,外用藥物與敷料的評(píng)價(jià)結(jié)果臨床參考價(jià)值高,被國(guó)際動(dòng)物創(chuàng)傷學(xué)會(huì)列為推薦細(xì)胞系。

  • 局限性

  1. 培養(yǎng)條件較苛刻:對(duì)血清中生長(zhǎng)因子含量敏感,低成本血清會(huì)導(dǎo)致修復(fù)因子分泌下降 30%,培養(yǎng)成本是 PK-15 細(xì)胞的 1.5 倍。

  1. 病毒譜較局限:對(duì)腎嗜性病毒(如豬瘟病毒)的敏感性?xún)H為 PK-15 的 30%,需與腎細(xì)胞系配合使用以覆蓋全身病毒研究。

  1. 功能穩(wěn)定性依賴(lài)傳代:連續(xù)傳代超過(guò) 130 代后 α-SMA 表達(dá)量下降 15%,需定期通過(guò)創(chuàng)傷應(yīng)激篩選以維持活化特性。

五、研究意義與展望
SSC-S4 細(xì)胞系的建立為豬皮膚創(chuàng)傷修復(fù)研究提供了精準(zhǔn)工具,其在促愈合藥物篩選中的應(yīng)用,使家豬皮膚創(chuàng)傷平均愈合時(shí)間從 14 天縮短至 9 天。未來(lái),通過(guò)基因編輯技術(shù)增強(qiáng)其瘢痕抑制相關(guān)基因(如 MMP-1)的表達(dá),可優(yōu)化瘢痕模型;結(jié)合 3D 生物打印技術(shù)構(gòu)建含血管網(wǎng)絡(luò)的皮膚等效物,有望模擬復(fù)雜創(chuàng)面的修復(fù)過(guò)程。作為皮膚成纖維細(xì)胞的代表,SSC-S4 與 PK-15 等腎細(xì)胞系形成 “體表 - 內(nèi)臟" 研究網(wǎng)絡(luò),共同推動(dòng)豬源細(xì)胞模型在創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)與獸用藥物研發(fā)中的應(yīng)用。

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