來源與形態：CHO-K1 源自中國倉鼠卵巢細胞（CHO），通過單細胞克隆技術篩選獲得純度更高的亞系。體外培養時呈典型上皮樣形態，貼壁生長，細胞呈多邊形，排列緊密且邊界清晰，較野生型 CHO 細胞形態更均一。在 37℃、5% CO?的培養條件下，增殖速度穩定，傳代周期約 2-3 天，可適應貼壁培養、懸浮培養及無血清培養基體系，尤其適合高密度培養。

遺傳特征：保留 CHO 細胞的非整倍體核型（染色體數目約 20-22 條），但核型更穩定，基因組背景清晰，無內源性病毒序列。與 dhFr 缺陷型 CHO 細胞不同，CHO-K1 為原型細胞系，不攜帶營養缺陷標記，可自主合成核酸前體物質，無需依賴外源性營養補充。其基因組對外源基因的容納能力強，轉染后可通過抗性篩選快速獲得穩定表達株，且長期傳代后仍能維持目標蛋白的表達穩定性。

優勢：培養條件簡單，無需特殊營養補充，適合實驗室小規模研究與工業化大規模生產；遺傳穩定性高，實驗重復性好，被國際監管機構（如 FDA、EMA）認可為生物藥生產的合規細胞系；對外源基因的兼容性強，可表達多種類型的重組蛋白，且表達量穩定。

局限性：重組蛋白表達量通常低于 dhFr 缺陷型 CHO 細胞（需通過基因編輯或培養優化提升產量）；部分復雜蛋白（如多亞基蛋白）的表達效率較低，可能受限于細胞自身的折疊與組裝能力；長期懸浮培養可能出現細胞聚集體，影響蛋白純化效率。

培養條件：常規使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 或 MEM 培養基，添加青mei素 - 鏈mei素預防污染。若用于蛋白生產，可改用化學成分明確的無血清培養基，減少外源蛋白干擾。培養過程中需控制細胞密度（貼壁培養融合度不超過 85%），避免過度密集導致細胞形態改變或增殖停滯。

污染防控：貼壁細胞易受支原體、真菌污染，需定期通過 PCR 或熒光染色檢測；凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液，液氮保存可長期維持活性，復蘇時 37℃快速解凍并離心去除 DMSO，降低細胞損傷風險。