H22小鼠肝癌瘤株細胞系
H22小鼠肝癌瘤株細胞系源自昆明小鼠的自發性肝癌，因且移植成瘤率高，成為肝癌研究領域應用zui廣泛的動物模型之一。其能穩定模擬人類肝癌的生長特性與病理特征，在肝癌發病機制、藥物篩選及移植瘤模型構建中發揮著不可替代的作用，尤其在體內實驗研究中具有du特優勢。
該瘤株的原代細胞呈上皮樣貼壁生長，形態以多邊形為主，部分呈短梭形，宛如散落在培養皿上的 “不規則團塊"。細胞直徑約 18-25 微米，胞質豐富，可見散在的脂滴和空泡 —— 這是肝癌細胞的典型胞質特征；細胞核大而圓，核質比約 1:1.5，染色質呈粗顆粒狀，核仁明顯（1-3 個），顯示出活躍的增殖活性。與其他肝癌細胞系相比，H22 細胞的增殖速度更快，倍增時間約 20-24 小時，當融合度達到 80% 時需傳代，傳代時用 EDTA 溶液輕柔處理后吹打即可使細胞脫落，按 1:4-1:6 比例接種，連續傳代 50 次仍能保持穩定的致瘤性。
作為可移植性瘤株，H22 的最大da優勢在于體內成瘤的穩定性。通過腹腔注射或皮下接種昆明小鼠，成瘤率可達 100%：皮下接種后 7-10 天形成可觸及的腫瘤結節，21 天左右腫瘤體積可達 1-2 cm3，腫瘤組織呈灰白色，質地較硬，與周圍組織界限相對清晰；腹腔注射則會形成腹水型腫瘤，14 天左右腹水體積可達 5-8 mL，腹水中含有大量存活的腫瘤細胞，可直接用于傳代或實驗，這種雙重成瘤特性使其能滿足不同研究需求 —— 皮下瘤模型適合評估藥物對實體瘤的抑制效果，腹水瘤模型則便于獲取大量腫瘤細胞用于體外實驗。
在肝癌發病機制研究中，H22 瘤株是解析腫瘤增殖與轉移機制的理想工具。其保留了肝癌的關鍵分子特征，如高表達甲胎蛋白（AFP）—— 腫瘤組織中 AFP 含量可達 500-800 ng/mL，與人類肝癌的 AFP 升高特征高度一致；同時存在 Wnt/β- 連環蛋白信號通路異常激活，β- 連環蛋白在細胞核內積累，導致下游靶基因 c-Myc、Cyclin D1 的表達量上調 3-4 倍，推動細胞無限增殖。實驗顯示，通過 RNA 干擾技術沉默 β- 連環蛋白基因，可使 H22 細胞的克隆形成能力下降 60%，裸鼠移植瘤體積縮小 70%，直接證實該通路在肝癌進展中的驅動作用。此外，該瘤株具有一定的轉移潛能，通過尾靜脈注射可在肺部形成轉移性結節，轉移率約 30%，轉移灶的病理特征與人類肝癌肺轉移相似，為研究肝癌轉移機制提供了可靠模型。
在藥物篩選領域，H22 瘤株因模型構建簡便、結果穩定而成為體內藥效評價的金標準。其對多種經典抗癌藥物敏感，例如，5 - 氟尿*啶處理可使皮下瘤的抑瘤率達 40%-50%，shun鉑處理則可使腹水瘤的生存時間延長 30% 以上，藥物敏感性與臨床肝癌患者的響應特征具有一定相關性。在新型藥物研發中，該模型可用于評估藥物的體內抗腫瘤活性，如中藥提取物槐耳清膏處理后，腫瘤組織中血管內皮生長因子（VEGF）的表達量下降 50%，微血管密度減少 40%，抑瘤率達 55%，為中藥抗腫瘤的臨床應用提供了實驗依據。同時，H22 移植瘤模型可用于研究藥物聯合治療策略，如將hua療藥物與免疫調節劑聯用，發現協同效應可使抑瘤率提升至 70%，遠高于單藥治療，為優化臨床治療方案提供了參考。
在腫瘤免疫研究中，H22 瘤株的免疫原性特征使其成為免yi治療研究的理想模型。其表達多種腫瘤相關抗原，如熱休克蛋白 70（HSP70）和癌胚抗原（CEA），可被免疫系統識別。昆明小鼠作為免疫健全的宿主，其移植瘤模型能真實模擬人類肝癌的腫瘤免疫微環境 —— 腫瘤組織中存在大量調節性 T 細胞（Treg）和 M2 型巨噬細胞，這些免疫抑制細胞可分泌 IL-10、TGF-β 等細胞因子，抑制效應 T 細胞的抗腫瘤活性，導致腫瘤免疫逃逸。在免疫檢查點抑制劑研究中，使用抗 PD-1 抗體處理荷瘤小鼠，可使腫瘤內 CD8?T 細胞浸潤增加 2-3 倍，腫瘤生長抑制率達 45% 以上，這與臨床中部分肝癌患者對 PD-1 抑制劑響應的特征相似，為免yi治liao機制研究和聯合治療策略探索提供了jue佳模型。
在肝損傷與癌變關系研究中，H22 瘤株可用于構建肝炎 - 肝癌遞進模型。通過先誘導小鼠產生肝損傷（如四氯化碳處理），再接種 H22 細胞，可見腫瘤生長速度較正常小鼠快 2-3 倍，腫瘤組織中炎癥因子（如 TNF-α、IL-6）水平升高 3 倍，NF-κB 信號通路激活，證實慢性炎癥可促進肝癌進展，這與人類乙肝、丙肝病毒感染誘發肝癌的病理過程高度一致。利用該模型研究發現，抗炎藥物與抗癌藥物聯用可使抑瘤率提高 50%，為 “抗炎 - 抗癌" 聯合策略提供了實驗依據。
培養與保存 H22 瘤株需注意保持其生物學特性。體外培養時，基礎培養基選用 RPMI 1640，添加 10% 胎牛血清，培養環境為 37℃、5% CO?，定期檢測細胞的 AFP 分泌量，確保其肝癌特性未發生改變；體內傳代時，每 2-3 周通過腹腔注射傳代一次，選擇健康、腫瘤生長良好的小鼠腹水進行傳代，避免連續傳代超過 10 次，以防瘤株特性退化。長期保存可采用兩種方式：細胞懸液加入 10% DMSO 凍存于液氮中，復蘇存活率可達 80% 以上；或保存荷瘤小鼠的腫瘤組織塊，低溫凍存后復蘇接種，能快速獲得大量腫瘤細胞，兩種方法均可有效維持瘤株的穩定性。
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