Raji人Burkitt淋巴瘤細胞系
Raji人Burkitt淋巴瘤細胞系是研究 B 細胞淋巴瘤的經典模型,因攜帶 EB 病毒基因組且具備典型的 B 淋巴細胞特征,在淋巴瘤發病機制、病毒與腫瘤關聯及藥物研發領域應用廣泛,為解析 Burkitt 淋巴瘤的du特生物學行為提供了可靠工具。
來源與背景:該細胞系于 1963 年從一名 12 歲非洲 Burkitt 淋巴瘤患者的外周血中分離建立,是首ge被證實攜帶 EB 病毒基因組的人類淋巴瘤細胞系。與其他 B 細胞淋巴瘤細胞系(如 Ramos)相比,其更貼近 endemic 型 Burkitt 淋巴瘤的臨床特征,尤其適合研究 EB 病毒在淋巴瘤發生中的作用,為探索 “EB 病毒感染 - B 細胞轉化 - 淋巴瘤形成" 的分子機制提供了理想樣本,填bu了 EB 病毒相關淋巴瘤研究模型的空白。其明確的來源和長期傳代穩定性,使其成為 Burkitt 淋巴瘤基礎研究與臨床轉化的重要橋梁。
細胞特性:形態上呈圓形或類圓形,懸浮生長,無貼壁能力,細胞體積中等,細胞質豐富,可見空泡樣結構,細胞核圓形,染色質疏松,核仁明顯,具有 Burkitt 淋巴瘤細胞的典型形態特征。核心特性為EB 病毒基因組持續存在,攜帶完整的 EB 病毒基因組,可表達 EB 病毒核抗原(EBNA1、EBNA2)及潛伏膜蛋白(LMP1),這些病毒蛋白通過調控宿主細胞信號通路促進細胞永生化;B 淋巴細胞表型,高表達 B 細胞特異性標志物,如 CD19、CD20、CD22,同時表達表面免疫球蛋白 M(sIgM),符合成熟 B 淋巴細胞的分化特征;高增殖活性,體外培養時增殖速度快,細胞倍增時間約 24-30 小時,克隆形成率約 70%,在裸鼠模型中接種后 1-2 周即可形成腫瘤,成瘤率達 100%,且腫瘤組織能維持 EB 病毒表達,模擬臨床 Burkitt 淋巴瘤的快速生長特性。傳代時無需消化處理,直接吹打即可收獲細胞,傳代比例 1:5-1:8,連續傳代 60 次后仍能保持 EB 病毒攜帶狀態及 B 細胞表型。
培養條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,添加 1% 非必需氨基酸以維持細胞活性。培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 1-2 天更換一次培養基,細胞密度維持在 2×10?-2×10?個 /ml 之間,密度過高會導致細胞聚團及活力下降。與貼壁細胞系不同,其對振蕩敏感,培養過程中應避免劇烈晃動,傳代時通過離心(1000rpm,5 分鐘)收集細胞,用新鮮培養基重懸后接種,無需消化處理,可最da程度減少細胞損傷。此外,該細胞系對營養缺乏敏感,培養基中葡萄糖濃度需保持在 4.5g/L 以上,否則會顯著抑制增殖。
檢測鑒定:經微生物篩查,無支原體、細菌、真菌及其他外源病毒污染,符合實驗細胞質量標準。免疫表型分析顯示,CD19、CD20、CD22 呈強陽性表達,CD3 陰性,符合 B 淋巴細胞的免疫特征。EB 病毒檢測證實存在 EB 病毒基因組,EBNA1、LMP1 蛋白表達陽性,與 endemic 型 Burkitt 淋巴瘤的病毒攜帶狀態一致。染色體核型分析呈現亞三倍體核型,存在 t (8;14) 染色體易位,導致 c-MYC 基因與免疫球蛋白重鏈基因融合,這一遺傳學改變與臨床 Burkitt 淋巴瘤患者wan全一致,是其標志性特征。功能驗證實驗中,體外培養可自發分泌免疫球蛋白 M,裸鼠腹腔接種后可形成腹水型腫瘤,腹水中可見大量淋巴瘤細胞,模擬臨床 Burkitt 淋巴瘤的侵襲轉移特征。
應用領域:在發病機制研究中,該細胞系常用于解析 EB 病毒與 Burkitt 淋巴瘤的關聯,研究發現 LMP1 可激活 NF-κB 通路,促進細胞存活基因表達,同時 t (8;14) 易位導致 c-MYC 持續激活,共同驅動 B 細胞異常增殖,為理解 Burkitt 淋巴瘤的 “病毒 - 宿主基因協同致癌" 機制提供了關鍵線索。在抗病毒研究中,是評估 EB 病毒靶向藥物的常用模型,針對 EB 病毒 DNA 聚合酶的抑制劑可顯著抑制其 EB 病毒復制,減少病毒蛋白表達,為 EB 病毒相關腫瘤的治療提供實驗依據。在藥物篩選方面,適用于評估抗 Burkitt 淋巴瘤藥物的療效,通過檢測藥物對細胞增殖及凋亡的影響,篩選能特異性抑制 B 淋巴瘤細胞生長的候選藥物,如某些靶向 c-MYC 的抑制劑可顯著降低其增殖活性。此外,該細胞系可用于研究淋巴瘤細胞與免疫微環境的相互作用,與 T 細胞共培養時可誘導 T 細胞凋亡,為解析淋巴瘤的免疫逃逸機制提供實驗基礎。
該細胞系的優勢在于能穩定攜帶 EB 病毒基因組并保留 Burkitt 淋巴瘤的標志性遺傳學改變,為研究 “病毒感染 - 染色體易位 - 腫瘤發生" 的關聯提供了理想模型。通過與非 EB 病毒攜帶的 B 淋巴瘤細胞系的對比實驗,可清晰區分 EB 病毒在淋巴瘤發生中的du特作用,為 EB 病毒相關淋巴瘤的特異性治療策略制定提供實驗依據。
總之,Raji 人 Burkitt 淋巴瘤細胞系憑借其典型的 B 細胞特征、EB 病毒攜帶狀態及穩定的生物學特性,成為連接 Burkitt 淋巴瘤基礎研究與臨床轉化的重要橋梁,為解析淋巴瘤的發病機制、開發新型靶向藥物及優化治療方案提供了堅實的實驗基礎。
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