Jurkat E6-1細(xì)胞系
Jurkat E6-1細(xì)胞系是研究 T 淋巴細(xì)胞生物學(xué)特性與免疫調(diào)控機(jī)制的經(jīng)典模型，源自人類(lèi)急性 T 淋巴細(xì)胞白血病患者的外周血，因能穩(wěn)定表達(dá) T 細(xì)胞受體（TCR）復(fù)合體，在免疫信號(hào)傳導(dǎo)、自身免疫病及抗腫瘤免疫研究中具有不可替代的地位。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系源自 1977 年分離的 Jurkat 細(xì)胞克隆亞株，通過(guò)對(duì)原始 Jurkat 細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞克隆篩選，獲得能高表達(dá)功能性 TCR/CD3 復(fù)合體的 E6-1 亞型。與其他 Jurkat 亞株相比，其 TCR 信號(hào)傳導(dǎo)通路更為完整，經(jīng)抗原刺激后可發(fā)生典型的鈣離子內(nèi)流和細(xì)胞活化反應(yīng)，更貼近正常 T 細(xì)胞的活化特性，為研究 T 細(xì)胞活化的分子機(jī)制提供了標(biāo)準(zhǔn)化模型。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈圓形或橢圓形，細(xì)胞質(zhì)少而透亮，細(xì)胞核大且核仁明顯，以懸浮生長(zhǎng)為主，細(xì)胞大小均一，直徑約 10-15μm。核心特性包括完整的 T 細(xì)胞表型—— 高表達(dá) CD3、CD4、CD5 等 T 細(xì)胞表面標(biāo)志物，其中 CD3 分子的表達(dá)水平是普通 T 白血病細(xì)胞的 2 倍以上，TCRαβ 異二聚體表達(dá)穩(wěn)定；可誘導(dǎo)的活化特性，在抗 CD3 抗體或佛波酯（PMA）刺激下，能快速上調(diào) IL-2、IFN-γ 等細(xì)胞因子的表達(dá)，IL-2 分泌量可達(dá) 500-800pg/mL，模擬正常 T 細(xì)胞的活化應(yīng)答。細(xì)胞倍增時(shí)間約 36-48 小時(shí)，傳代時(shí)無(wú)需消化處理，直接按 1:4-1:6 比例稀釋傳代即可，連續(xù)傳代 60 次后仍能保持 TCR 表達(dá)和活化功能的穩(wěn)定。
培養(yǎng)條件：常規(guī)采用含 10% 胎牛血清的 RPMI1640 培養(yǎng)基，添加防污染試劑預(yù)防微生物污染，另需補(bǔ)充 1mmol/L 丙酮酸鈉和 50μmol/L β- 巰基乙醇以維持 T 細(xì)胞的活性。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，確保細(xì)胞密度控制在 5×10?-2×10? cells/mL 之間，密度過(guò)高易導(dǎo)致細(xì)胞聚集和活性下降。與貼壁細(xì)胞不同，其對(duì)培養(yǎng)液的 pH 變化較為敏感，需嚴(yán)格控制 pH 在 7.2-7.4 之間，可通過(guò)添加 HEPES 緩沖液增強(qiáng)培養(yǎng)基的 pH 穩(wěn)定性。傳代時(shí)應(yīng)避免劇烈吹打，以防細(xì)胞破裂，離心速度以 200×g 為宜，減少對(duì)細(xì)胞的機(jī)械損傷。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，該細(xì)胞系無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及人類(lèi)逆轉(zhuǎn)錄病毒污染，符合生物安全標(biāo)準(zhǔn)。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，CD3?CD4?細(xì)胞比例達(dá) 95% 以上，TCRαβ 陽(yáng)性率超過(guò) 90%，明確其 CD4?T 細(xì)胞表型。染色體核型分析呈現(xiàn)人類(lèi) T 淋巴細(xì)胞白血病的典型核型特征，存在 8 號(hào)染色體三體和 14 號(hào)染色體易位，與 T 細(xì)胞白血病的遺傳學(xué)改變一致。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，抗 CD3 抗體刺激后 30 分鐘內(nèi)可檢測(cè)到明顯的鈣離子熒光強(qiáng)度升高，證實(shí)其 TCR 信號(hào)通路的完整性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在免疫信號(hào)研究中，該細(xì)胞系常用于解析 TCR/CD3 介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制，通過(guò)基因敲除或過(guò)表達(dá)技術(shù)，探索 Lck、ZAP-70 等激酶在 T 細(xì)胞活化中的作用，為理解免疫突觸形成和信號(hào)放大過(guò)程提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。在自身免疫病模型構(gòu)建中，可通過(guò)轉(zhuǎn)入自身反應(yīng)性 TCR 基因，模擬多發(fā)性硬化癥、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病中的 T 細(xì)胞異常活化，研究自身抗原識(shí)別與免疫耐受打破的機(jī)制。在抗腫瘤免疫研究中，適用于 CAR-T 細(xì)胞的功能驗(yàn)證，通過(guò)將 CAR 基因?qū)?Jurkat E6-1 細(xì)胞，檢測(cè)其對(duì)腫瘤靶細(xì)胞的特異性殺傷活性，優(yōu)化 CAR 結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)。在藥物篩選方面，可用于評(píng)估免疫調(diào)節(jié)劑的活性，如檢測(cè) PD-1 抑制劑對(duì) T 細(xì)胞活化的促進(jìn)作用，通過(guò) IL-2 分泌量和細(xì)胞增殖率判斷藥物效能。
該細(xì)胞系的du特優(yōu)勢(shì)在于兼具腫瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖能力與正常 T 細(xì)胞的活化特性，通過(guò)與原代 T 細(xì)胞的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，可區(qū)分先天缺陷與后天調(diào)控異常導(dǎo)致的免疫功能障礙。其標(biāo)準(zhǔn)化的培養(yǎng)體系和明確的表型特征，也使其成為跨實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)比對(duì)的基準(zhǔn)模型，推動(dòng)了 T 細(xì)胞研究的規(guī)范化發(fā)展。
總之，Jurkat E6-1 細(xì)胞系憑借完整的 T 細(xì)胞功能表型和穩(wěn)定的生物學(xué)特性，成為連接基礎(chǔ)免疫學(xué)研究與免yi治療應(yīng)用的重要橋梁，為解析 T 細(xì)胞活化機(jī)制、開(kāi)發(fā)新型免疫療法提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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