WEHI 164小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
WEHI 164小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系,是研究纖維肉瘤生物學(xué)特性與抗腫瘤藥物開發(fā)的重要模型,因具有顯著的侵襲性和細(xì)胞因子應(yīng)答特性,在腫瘤微環(huán)境互作及信號通路研究中應(yīng)用廣泛。
來源與背景:該細(xì)胞系源自 BALB/c 小鼠的誘發(fā)性纖維肉瘤,通過甲基膽蒽誘導(dǎo)小鼠皮下組織形成腫瘤后,經(jīng)體外分離培養(yǎng)建立。作為 WEHI 系列細(xì)胞系的重要成員,其保留了纖維肉瘤的間葉組織起源特征,同時(shí)在長期傳代中形成了對多種細(xì)胞因子的高敏感性,為研究細(xì)胞因子介導(dǎo)的腫瘤調(diào)控機(jī)制提供了du特工具,其遺傳背景與 BALB/c 小鼠的兼容性使其在同源動(dòng)物模型中具有高度適用性。
細(xì)胞特性:形態(tài)上呈典型梭形,細(xì)胞質(zhì)豐富且伸展性強(qiáng),細(xì)胞核呈長橢圓形,貼壁生長時(shí)呈平行或漩渦狀排列,細(xì)胞間可見明顯的絲狀偽足連接。核心特性包括強(qiáng)侵襲轉(zhuǎn)移性—— 體外 Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿膜能力是普通肉瘤細(xì)胞的 2 倍以上,高表達(dá) MMP-13 和波形蛋白,可降解 Ⅰ 型膠原等細(xì)胞外基質(zhì);細(xì)胞因子應(yīng)答敏感,對 TNF-α、IL-1 等炎癥因子表現(xiàn)出顯著的增殖或凋亡應(yīng)答,其中 TNF-α 可誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡,凋亡率隨濃度升高呈線性增加,這一特性使其成為研究細(xì)胞因子抗腫瘤機(jī)制的理想模型。細(xì)胞倍增時(shí)間約 22-28 小時(shí),傳代時(shí)需用 0.25% 胰dan白酶充分消化,傳代比例 1:3-1:5,連續(xù)傳代 60 次后仍能保持穩(wěn)定的形態(tài)與功能特性。
培養(yǎng)條件:常規(guī)采用含 10% 胎牛血清的 RPMI1640 培養(yǎng)基,添加 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液預(yù)防污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基,確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期時(shí)能獲得充足營養(yǎng)。與上皮來源腫瘤細(xì)胞不同,其對培養(yǎng)表面的黏附性較弱,傳代時(shí)易形成細(xì)胞團(tuán),需通過輕柔吹打分散成單細(xì)胞懸液,以避免局部密度過高導(dǎo)致的生長抑制。此外,因?qū)?xì)胞因子敏感,培養(yǎng)體系中應(yīng)避免引入外源性細(xì)胞因子污染,血清需經(jīng)活性炭處理以去除潛在干擾因子。
檢測鑒定:經(jīng)嚴(yán)格微生物篩查,該細(xì)胞系無支原體、細(xì)菌、真菌及小鼠內(nèi)源病毒污染,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性。免疫熒光檢測顯示,其高表達(dá)間葉組織標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin),不表達(dá)上皮標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白,明確其纖維肉瘤來源。染色體核型分析呈現(xiàn)小鼠纖維肉瘤典型的核型特征,染色體數(shù)目存在非整倍體變異,與腫瘤細(xì)胞的遺傳不穩(wěn)定性一致。通過細(xì)胞因子刺激實(shí)驗(yàn),可驗(yàn)證其對 TNF-α 等因子的應(yīng)答活性,確認(rèn)功能完整性。
應(yīng)用領(lǐng)域:在腫瘤侵襲機(jī)制研究中,WEHI 164 細(xì)胞系常用于探索基質(zhì)金屬蛋白酶家族在腫瘤侵襲中的作用,通過基因沉默或抑制劑實(shí)驗(yàn),可明確 MMP-13 對纖維肉瘤侵襲的調(diào)控效應(yīng)。在細(xì)胞因子研究中,其對 TNF-α 的敏感性使其成為該因子抗腫瘤機(jī)制的經(jīng)典模型,可用于解析 TNF-α 通過死亡受體介導(dǎo)的凋亡信號通路。在藥物篩選方面,廣泛應(yīng)用于抗侵襲藥物的活性評估,通過檢測藥物對細(xì)胞遷移、基質(zhì)降解能力的抑制效果,篩選潛在的抗纖維肉瘤化合物。在動(dòng)物模型構(gòu)建中,皮下接種 BALB/c 小鼠可形成與人類纖維肉瘤相似的實(shí)體瘤,成瘤率達(dá) 100%,且腫瘤組織具有豐富的血管和壞死中心,適合評估藥物的體內(nèi)療效及腫瘤微環(huán)境靶向治療策略。
該細(xì)胞系的優(yōu)勢在于將纖維肉瘤的侵襲特性與細(xì)胞因子敏感性相結(jié)合,為研究腫瘤與微環(huán)境的相互作用提供了一體化模型。其對 TNF-α 的特異性應(yīng)答不僅助力基礎(chǔ)機(jī)制研究,也為 TNF-α 相關(guān)的免yi治療策略提供了臨床前評估工具,在纖維肉瘤這種對傳統(tǒng)hua療不敏感的腫瘤類型研究中具有不可替代的價(jià)值。
總之,WEHI 164 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系憑借du特的生物學(xué)特性,成為連接基礎(chǔ)腫瘤生物學(xué)與臨床轉(zhuǎn)化研究的重要橋梁,為纖維肉瘤的診斷標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和治療策略開發(fā)提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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