Ca763小鼠乳腺癌瘤株細胞系
Ca763小鼠乳腺癌瘤株細胞系源自 615 近交系小鼠的自發性乳腺癌組織，是具有高成瘤速度和多器官轉移特性的惡性腫瘤模型，尤其傾向于肺和骨組織轉移，在乳腺癌血行播散機制、器官特異性轉移調控及綜he治療策略研究中具有重要價值，為解析乳腺癌跨器官轉移的分子異質性提供了du特工具。
該細胞系呈現典型的高度惡性上皮細胞形態與表型特征。顯微鏡下，細胞呈長梭形或不規則形，貼壁生長為主，部分細胞呈半懸浮狀態，排列松散無極性，細胞大小差異顯著（直徑 10-25μm），核質比ji高，細胞核畸形明顯，可見多核、分葉核及巨核現象，染色質呈粗顆粒狀凝集，核仁明顯且數量多（3-4 個），核分裂象活躍（每 10 個高倍視野 12-15 個），胞質少而嗜堿性，可見大量絲狀偽足，電鏡下胞質內含有豐富的微絲束，細胞間連接極少，體現出強侵襲表型。免疫表型分析顯示，細胞高表達乳腺癌標志物細胞角蛋白 19（CK19）和上皮細胞黏附分子（EpCAM），流式細胞術檢測陽性率分別達 90% 和 85%，同時特異性表達肺轉移相關分子 CD44v6 和骨轉移相關分子 RANKL，其中 RANKL 在細胞表面的表達量較 Ca761 細胞高 4 倍，為其多器官轉移特性提供分子基礎。
體外培養體系中，Ca763 細胞展現出快速增殖能力與強轉移潛能。最適培養條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基，在 37℃、5% CO?環境下，傳代周期約 48 小時，對數生長期細胞活力達 95% 以上，倍增時間約 28 小時，成瘤速度顯著快于 Ca761 細胞。其顯著特點是體外侵襲與遷移能力ji強，Transwell 侵襲實驗中 24 小時穿透基質膠的細胞數是 Ca761 細胞的 1.8 倍，劃痕愈合實驗 12 小時愈合率達 90%，這種高效運動能力與其高表達 MMP-2 和 MMP-9 相關，酶譜分析顯示其 MMP 活性較 Ca759 細胞高 2.3 倍。軟瓊脂克隆形成率達 40%，克隆形態不規則，邊緣呈放射狀突起，提示其高度惡性的克隆形成能力。凍存復蘇性能優異，液氮凍存后復蘇存活率超 90%，連續傳代 50 次后，多器官轉移相關分子表達及侵襲能力無明顯衰減，保證實驗的穩定性與可重復性。
Ca763 細胞的核心價值體現在其對多器官轉移過程的精準模擬。在動物模型中，將 1×10?個細胞接種于 615 小鼠乳腺脂肪墊，10 天即可形成可觸及的原發瘤，21 天肺轉移率達 80%（表現為雙肺彌漫性小結節），28 天骨轉移率達 65%（主要累及股骨和脛骨），轉移灶病理顯示腫瘤細胞保留 CK19 表達，肺轉移灶可見肺泡間隙浸潤，骨轉移灶則伴隨骨質破壞和破骨細胞聚集。通過熒光標記追蹤發現，腫瘤細胞經血管播散后，在肺組織通過 CD44v6 與肺泡上皮細胞黏附定植，在骨組織通過 RANKL 與破骨細胞相互作用促進溶骨環境形成，這種 "血管侵襲 - 器官定植 - 微環境改造" 的轉移模式，與人類乳腺癌多器官轉移的臨床特征高度一致。
在肺轉移機制研究中，該細胞系揭示了器官特異性黏附的分子機制。細胞高表達 CD44v6，可與肺組織特異性表達的透明質酸結合，流式細胞術檢測顯示其與肺微血管內皮細胞的黏附率達 50%，是與腎內皮細胞黏附率的 3 倍，沉默 CD44v6 后，肺轉移率降至 30%，同時細胞對透明質酸的結合能力下降 70%。基因芯片分析顯示，肺轉移灶細胞中 CXCR4 表達上調，與肺組織高表達的 CXCL12 形成趨化軸，促進腫瘤細胞在肺內增殖，CXCR4 拮抗劑處理可使肺轉移灶數量減少 60%。
在骨轉移機制研究中，Ca763 細胞通過 RANKL-RANK 通路調控骨微環境。細胞分泌的 RANKL 可激活破骨細胞的 NF-κB 通路，促進骨吸收，骨片共培養實驗顯示其可使破骨細胞活性增加 2.5 倍，骨吸收陷窩面積擴大 3 倍，而 RANKL 抗體處理可wan全阻斷這種作用。此外，骨基質釋放的 TGF-β 可反過來刺激腫瘤細胞分泌更多 RANKL，形成 "腫瘤細胞 - 破骨細胞" 惡性循環，TGF-β 受體抑制劑處理可使骨轉移率下降 45%，證實該環路在骨轉移中的核心作用。
在腫瘤微環境研究中，該細胞系與不同器官基質細胞的相互作用為解析轉移微環境提供了線索。與肺成纖維細胞共培養時，可誘導其分泌 IL-8，促進腫瘤細胞增殖，使克隆形成率提升 40%；與骨髓間充質干細胞共培養時，可上調腫瘤細胞的 survivin 表達，凋亡率下降 50%。在缺氧條件下，細胞 HIF-1α 表達顯著上調，誘導血管內皮生長因子（VEGF）分泌增加，促進血管生成，條件培養基可使血管內皮細胞管腔形成數增加 3 倍，為血行轉移提供通道。
在藥物篩選應用中，Ca763 細胞是評估多器官抗轉移藥物的理想模型。體外實驗顯示，細胞對紫shan醇的 IC50 為 0.8μM，聯合使用 RANKL 抗體后，骨轉移相關基因表達下降 55%；體內實驗中，紫shan醇與 CXCR4 拮抗劑聯用可使肺轉移率從 80% 降至 35%，與 RANKL 抗體聯用可使骨轉移率從 65% 降至 25%，證實聯合靶向治療對多器官轉移的抑制作用。某天然藥物提取物處理后，細胞 MMP 活性下降 60%，肺和骨轉移灶數量分別減少 50% 和 45%，顯示出廣譜抗轉移潛力。
在激素相關性研究中，Ca763 細胞表現為雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）雙陰性，屬于三陰性乳腺癌模型，不受激素調控影響，細胞增殖和轉移能力主要依賴 EGFR 和 HER2 信號通路，HER2 抗體處理可使細胞增殖率下降 40%，轉移能力下降 50%，為三陰性乳腺癌的靶向治療研究提供了實驗基礎。
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