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首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1475GSnFB-L2犬蝠肺細(xì)胞系

GSnFB-L2犬蝠肺細(xì)胞系
產(chǎn)品型號(hào):BY-1475
簡(jiǎn)要描述:

GSnFB-L2犬蝠肺細(xì)胞系為貼壁生長(zhǎng)的上皮細(xì)胞系,保留肺組織特性,高表達(dá)肺表面活性蛋白,適用于蝙蝠肺生理、病毒宿主互作及呼吸道疾病機(jī)制研究。

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詳細(xì)介紹

GSnFB-L2犬蝠肺細(xì)胞系
GSnFB-L2犬蝠肺細(xì)胞系是從犬蝠(Cynopterus sphinx)肺組織分離建立的原代上皮細(xì)胞系,保留了蝙蝠肺部te有的生物學(xué)特征。與 GSnFB-S1 犬蝠皮膚細(xì)胞系的皮膚組織特性不同,其核心價(jià)值在于模擬蝙蝠肺的生理結(jié)構(gòu)與病毒宿主互作機(jī)制,成為研究蝙蝠肺生理特性、病毒儲(chǔ)備及呼吸道疾病的獨(dú)te模型。該細(xì)胞系對(duì)呼吸道病毒的易感譜覆蓋 15 種蝙蝠相關(guān)病毒(是普通哺乳動(dòng)物肺細(xì)胞系的 4 倍),與 GSnFB-S1 細(xì)胞系形成 “肺 - 皮膚" 組織研究的互補(bǔ)體系,在病毒學(xué)與比較醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有重要意義。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來源與分離特征

GSnFB-L2 細(xì)胞系源自 2020 年研究者對(duì)健康成年犬蝠進(jìn)行無菌肺組織活檢,通過組織塊培養(yǎng)法獲得原代上皮細(xì)胞,經(jīng)支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)純化而成(“GSnFB-L2" 代表犬蝠屬(Cynopterus)肺(Lung)第 2 代穩(wěn)定克?。?。該細(xì)胞系因蝙蝠肺特異性標(biāo)志物表達(dá)穩(wěn)定(>95%),2022 年被納入國(guó)際野生動(dòng)物細(xì)胞庫(kù),解決了蝙蝠肺原代細(xì)胞培養(yǎng)困難、傳代穩(wěn)定性差的問題,成為研究蝙蝠肺生物學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化模型。
  1. 形態(tài)與生長(zhǎng)特征

細(xì)胞呈立方狀上皮樣形態(tài),貼壁生長(zhǎng)時(shí)形成類似肺泡結(jié)構(gòu)的團(tuán)簇狀排列(與 GSnFB-S1 細(xì)胞的多邊形單層形態(tài)顯著不同),胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的板層小體(肺表面活性物質(zhì)合成特征),細(xì)胞核呈圓形(核質(zhì)比約 1:3.8,低于 GSnFB-S1 細(xì)胞)。在 35℃、5% CO?條件下(模擬蝙蝠體溫),使用添加 bovine pituitary extract(BPE)與表皮生長(zhǎng)因子的無血清培養(yǎng)基,倍增時(shí)間約 48-52 小時(shí)(稍短于 GSnFB-S1 細(xì)胞),接種密度 1.5×10?細(xì)胞 /cm2 時(shí),7 天融合度達(dá) 75%(增殖速率適中)。連續(xù)傳代 60 次后仍保持肺上皮形態(tài),核型穩(wěn)定(染色體數(shù)目 36 條,符合犬蝠核型特征),肺特異性功能無顯著衰減,適合長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)研究。
  1. 功能特性

  • 肺特異性標(biāo)志物表達(dá):高表達(dá)蝙蝠肺上皮標(biāo)志物如肺表面活性蛋白 A(SP-A,90% 陽(yáng)性)、克拉拉細(xì)胞蛋白 10(CC10,85% 陽(yáng)性),以及氣道防御相關(guān)基因 Cyno-PBP-1(表達(dá)量是小鼠肺細(xì)胞的 5 倍),與 GSnFB-S1 細(xì)胞的皮膚標(biāo)志物無交叉表達(dá);其肺表面活性物質(zhì)中磷脂含量達(dá) 120μg/mg 蛋白(是小鼠肺細(xì)胞的 2.5 倍),具有更強(qiáng)的表面張力調(diào)節(jié)能力,體現(xiàn)對(duì)飛行時(shí)肺擴(kuò)張的適應(yīng)性。

  • 病毒感染與耐受特征:對(duì)蝙蝠流感病毒、副黏病毒等呼吸道病毒的易感率達(dá) 100%,但感染后僅出現(xiàn)輕微細(xì)胞病變(CPE),病毒可持續(xù)復(fù)制 50 天以上(滴度維持 10??? TCID??/mL);與 GSnFB-S1 細(xì)胞的皮膚免疫特征類似,其胞內(nèi)天然免疫基因(如 TLR3、MDA5)表達(dá)量是犬肺細(xì)胞的 2.8 倍,但激活閾值顯著升高(病毒 RNA 刺激后 IFN-α 分泌量?jī)H為犬細(xì)胞的 1/6),體現(xiàn)蝙蝠肺部對(duì)病毒的 “免疫耐受 - 持續(xù)攜帶" 特性。

  • 氣體交換相關(guān)代謝:具備高效的氧利用能力,細(xì)胞色素氧化酶活性達(dá) 90U/mg 蛋白(是小鼠肺細(xì)胞的 3 倍),可在低氧環(huán)境下(5% O?)維持正常代謝(ATP 生成量下降<10%);碳酸酐酶活性達(dá) 65U/mg 蛋白,快速調(diào)節(jié)酸堿平衡,適應(yīng)飛行時(shí)的呼吸模式變化。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 蝙蝠肺生理與適應(yīng)性進(jìn)化研究

  • 飛行相關(guān)肺功能機(jī)制:利用 GSnFB-L2 細(xì)胞發(fā)現(xiàn),其肺表面活性蛋白 A 的第 156 位氨基酸為脯an酸(哺乳動(dòng)物多為丙an酸),通過增強(qiáng)蛋白穩(wěn)定性(熱變性溫度提高 8℃);敲除該位點(diǎn)后,細(xì)胞對(duì)機(jī)械牽拉的耐受能力下降 70%,證實(shí)其在適應(yīng)飛行時(shí)肺反復(fù)擴(kuò)張中的作用(與 GSnFB-S1 細(xì)胞的皮膚機(jī)械適應(yīng)形成組織功能對(duì)比)。

  • 氣道防御體系解析:通過轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)合細(xì)胞模型,鑒定出犬蝠肺te有的 Cyno-PBP-1 可廣譜抑制呼吸道病毒(對(duì)流感病毒的阻斷率達(dá) 65%),且與細(xì)菌脂多糖存在互作(可協(xié)同增強(qiáng)抗炎反應(yīng),IL-6 分泌量下降 40%);該防御肽的表達(dá)受氣道菌群代謝物調(diào)控(短鏈脂肪酸刺激后表達(dá)量提升 3.5 倍),揭示蝙蝠肺部 “微生物 - 宿主 - 病毒" 的動(dòng)態(tài)平衡機(jī)制。

  1. 蝙蝠病毒儲(chǔ)備與跨種傳播研究

  • 流感病毒持續(xù)性感染機(jī)制:在 GSnFB-L2 細(xì)胞中,蝙蝠流感病毒通過調(diào)控細(xì)胞凋亡通路實(shí)現(xiàn)持續(xù)復(fù)制 —— 病毒 NS1 蛋白與凋亡蛋白 Bax 結(jié)合(結(jié)合常數(shù) 1.8×10??M),抑制線粒體凋亡途徑( caspase-3 活性下降 60%);使用凋亡誘導(dǎo)劑后,病毒滴度下降 85%(該機(jī)制在 GSnFB-S1 細(xì)胞中因病毒嗜性不同無法研究)。

  • 跨種傳播潛能評(píng)估:通過基因編輯使 GSnFB-L2 細(xì)胞表達(dá)人唾液酸受體(α-2,6 - 唾液酸),發(fā)現(xiàn)蝙蝠流感病毒對(duì)人源受體的結(jié)合效率僅為犬蝠受體的 12%,但在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制效率提升 2.5 倍,提示跨種傳播的瓶頸主要在入侵階段;該模型預(yù)測(cè)的病毒跨種風(fēng)險(xiǎn)與流行病學(xué)數(shù)據(jù)一致性達(dá) 85%,為呼吸道傳染病預(yù)警提供工具。

  1. 抗病du藥物篩選與生態(tài)保護(hù)

  • 蝙蝠源呼吸道病毒抑制劑篩選:建立基于 GSnFB-L2 細(xì)胞的高通量篩選模型,發(fā)現(xiàn)某天然產(chǎn)物可抑制蝙蝠副黏病毒 F 蛋白介導(dǎo)的膜融合(IC??=1.5μM),且對(duì)細(xì)胞毒性極低(CC??>60μM);該化合物在蝙蝠肺類器官模型中顯示可降低病毒載量 10?倍,且不影響蝙蝠正常肺功能(與 GSnFB-S1 細(xì)胞用于皮膚病du藥物篩選形成不同組織的應(yīng)用案例)。

  • 棲息地空氣污染對(duì)肺免疫的影響:模擬霧霾顆粒暴露(添加 PM2.5 處理),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的 Cyno-PBP-1 表達(dá)量下降 50%,病毒易感性提升 2.3 倍(流感病毒復(fù)制滴度增加 150 倍),證實(shí)環(huán)境壓力可增強(qiáng)蝙蝠病毒溢出風(fēng)險(xiǎn),為野生動(dòng)物保護(hù)與公共衛(wèi)生的交叉研究提供依據(jù)。

三、優(yōu)勢(shì)與局限性
  • 優(yōu)勢(shì)

  1. 組織特異性強(qiáng):與 GSnFB-S1 細(xì)胞的皮膚特性不同,該細(xì)胞系保留犬蝠肺的獨(dú)te生物學(xué)特征,是研究蝙蝠肺生理與病毒互作的唯yi穩(wěn)定模型,避免了使用野生動(dòng)物的倫理與樣本限制。

  1. 病毒研究?jī)r(jià)值高:可模擬蝙蝠肺部對(duì)呼吸道病毒的 “無癥狀攜帶" 狀態(tài),比普通肺細(xì)胞系更精準(zhǔn)反映病毒在自然宿主中的復(fù)制特征,為理解病毒儲(chǔ)備機(jī)制提供關(guān)鍵工具。

  1. 進(jìn)化研究獨(dú)te性:其te有的表面活性蛋白組成、氧代謝途徑與免疫調(diào)節(jié)模式,為解析蝙蝠飛行適應(yīng)性進(jìn)化的細(xì)胞分子機(jī)制提供了可操作的研究平臺(tái)。

  • 局限性

  1. 培養(yǎng)條件苛刻:需嚴(yán)格控制溫度(35℃)與無血清環(huán)境,培養(yǎng)成本是 GSnFB-S1 細(xì)胞的 1.2 倍,且傳代次數(shù)有限(60 代 vs 50 代),大規(guī)模實(shí)驗(yàn)難度較大。

  1. 物種代表性限制:僅來源于犬蝠單一物種,無法wan全代表所有蝙蝠的肺特性(如食蟲蝙蝠與果蝠存在差異),研究結(jié)論需結(jié)合其他蝙蝠細(xì)胞系驗(yàn)證。

  1. 功能研究局限:缺乏完整的肺組織結(jié)構(gòu)(如血管、平滑?。糠址喂δ埽ㄈ绾粑?jié)律調(diào)節(jié))無法在單一細(xì)胞系中模擬。

四、研究意義與展望
GSnFB-L2 犬蝠肺細(xì)胞系的建立為蝙蝠肺部生物學(xué)研究提供了突破性工具,其與 GSnFB-S1 細(xì)胞系形成的 “肺 - 皮膚" 組織研究體系,推動(dòng)了蝙蝠整體生理與病毒互作機(jī)制的研究。未來,通過構(gòu)建肺類器官模型可整合多種肺細(xì)胞類型,更真實(shí)模擬蝙蝠肺組織結(jié)構(gòu);結(jié)合單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),可解析病毒感染時(shí)的細(xì)胞異質(zhì)性反應(yīng)。作為研究蝙蝠 - 呼吸道病毒共生關(guān)系的關(guān)鍵模型,其應(yīng)用將深化對(duì)新發(fā)呼吸道傳染病源頭的理解,同時(shí)為蝙蝠保護(hù)與公共衛(wèi)生安全的平衡提供科學(xué)依據(jù)。

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