MSMF鱸魚心臟成纖維細胞系
MSMF鱸魚心臟成纖維細胞系作為針對鱸魚心臟成纖維組織的特異性細胞模型，在海水魚類心臟結構維持、損傷修復及心血管疾病研究領域具有重要價值。它的建立為深入探究鱸魚心臟成纖維細胞的生理功能、與心肌細胞的相互作用以及病原體感染機制等提供了穩(wěn)定的體外研究平臺，對鱸魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展意義重大。
鱸魚是我國重要的海水養(yǎng)殖魚類，肉質鮮美，生長速度快，在沿海地區(qū)養(yǎng)殖規(guī)模龐大。心臟成纖維細胞作為心臟組織中的主要間質細胞，雖不直接參與收縮功能，卻承擔著合成細胞外基質、維持心臟結構完整性、參與心臟損傷修復等關鍵作用，其功能異常會導致心臟纖維化等病變，影響心臟正常功能。在養(yǎng)殖過程中，鱸魚的心臟易受水溫變化、水質污染、病原菌侵襲等因素影響，引發(fā)心臟疾病，導致生長受阻、死亡率上升。因此，建立 MSMF 鱸魚心臟成纖維細胞系，對于揭示心臟成纖維細胞的生理機制、研發(fā)心血管疾病防控技術具有重要的理論和實踐意義。
MSMF 鱸魚心臟成纖維細胞系的建立經(jīng)過了嚴謹規(guī)范的操作流程。選取健康的鱸魚，經(jīng)嚴格的無菌處理后，在超凈工作臺中小心解剖分離出心臟組織，去除心bao膜及大血管。將心臟組zhi剪碎成 1mm3 左右的小塊，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液反復沖洗，以清除血細胞和雜質。隨后加入 0.25% 胰dan白酶和 EDTA 混合溶液，在 25℃條件下消化 30-40 分鐘，使細胞分散。收集細胞懸液，經(jīng) 70μm 細胞濾網(wǎng)過濾后，1000r/min 離心 5 分鐘，棄上清，用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)液重懸細胞，接種于培養(yǎng)瓶中，置于 25℃恒溫培養(yǎng)箱中進行原代培養(yǎng)。培養(yǎng)初期，每 2-3 天更換一半培養(yǎng)液，待細胞匯合度達到 70%-80% 時進行傳代，目前該細胞系已穩(wěn)定傳代至 45 代以上，細胞活力保持在 85% 以上。
該細胞系呈現(xiàn)典型的成纖維樣細胞形態(tài)，細胞呈長梭形，排列疏松，胞質豐富，具有明顯的極性和較強的貼壁生長能力。生長特性研究顯示，MSMF 細胞在 DMEM/F12 培養(yǎng)液中生長狀態(tài)優(yōu)良，相較于其他培養(yǎng)基，細胞增殖速度提高約 25%；最適培養(yǎng)溫度為 24-26℃，與鱸魚的自然生存水溫相符；當胎牛血清濃度為 10% 時，細胞群體倍增時間最短，約為 60 小時。傳代至 35 代后，細胞形態(tài)和增殖速率無明顯變化，核型分析表明其染色體數(shù)目穩(wěn)定，遺傳穩(wěn)定性良好。
在功能特性方面，MSMF 鱸魚心臟成纖維細胞系展現(xiàn)出豐富的成纖維細胞功能。免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)，細胞表達成纖維細胞特異性標志物如波形蛋白、Ⅰ 型膠原蛋白，進一步證實了其成纖維細胞屬性。該細胞系具有較強的分泌功能，能合成和分泌多種細胞外基質成分，模擬體內心臟間質的構建過程，這對研究心臟結構維持機制具有重要意義。同時，MSMF 細胞在心肌細胞損傷模型中能表現(xiàn)出增殖活躍、遷移能力增強等特性，模擬心臟損傷后的修復反應，為研究心臟修復機制提供了理想模型。此外，該細胞系對鱸魚常見的病原菌如鰻弧菌、溶藻弧菌等表現(xiàn)出敏感性，感染后會出現(xiàn)細胞形態(tài)改變、分泌功能異常等病變特征，為研究病原菌對心臟間質組織的影響機制提供了良好材料。
MSMF 鱸魚心臟成纖維細胞系在多個研究領域應用廣泛。在心臟纖維化機制研究中，通過檢測細胞在不同刺激下的基質分泌變化，揭示了鱸魚心臟纖維化的發(fā)生途徑；在環(huán)境適應研究中，利用該細胞系評估了水溫、鹽度等環(huán)境因素對心臟成纖維細胞功能的影響，為鱸魚養(yǎng)殖環(huán)境優(yōu)化提供了依據(jù)；在藥物篩選方面，建立了基于細胞活性和基質分泌功能的篩選模型，已篩選出多種具有抑制心臟纖維化作用的化合物。
作為穩(wěn)定可靠的鱸魚心臟成纖維細胞模型，MSMF 不僅填bu了鱸魚心臟間質細胞研究的空白，更為海水魚類心臟支持組織生物學研究提供了重要工具，推動了鱸魚心血管疾病防控技術的研發(fā)，對保障鱸魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。
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