產品系統PRODUCT CENTER
在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展技術文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細介紹
來源與馴化:該細胞系源自 CHO-K1 細胞,通過多輪加壓篩選與傳代馴化獲得:初期以高表達綠色熒光蛋白(GFP)為報告基因,篩選高分泌克??;后續通過無血清培養基適應性培養,逐步增強懸浮生長能力與蛋白表達穩定性,最終獲得 CHO-X106 株系?!癤106" 代表其在馴化過程中第 106 代篩選獲得的優勢克隆,標識其經過系統優化的特性。
形態與增殖:體外培養呈典型上皮樣形態,可適應貼壁與懸浮兩種生長模式,懸浮培養時形成松散小聚集體(直徑 30-50μm),細胞圓潤飽滿,邊緣清晰,活力長期維持在 92% 以上。在 37℃、5% CO?條件下,增殖周期約 28-34 小時,適應無血清化學限定培養基(如 EX-CELL CHO Medium),高密度培養時細胞密度可達 1.2×10?個 /mL,傳代 100 次以上仍保持穩定生長速率,蛋白表達量無明顯衰減,凍存復蘇后存活率超 90%。
表達特征:該細胞系的核心優勢在于重組蛋白高表達能力:轉染外源基因后,抗體類蛋白表達量可達 6-8g/L(流加培養條件下),較普通 CHO-K1 提升 40%-60%;其分泌的重組蛋白糖基化修飾均一,唾液酸含量、巖藻糖比例等關鍵質量屬性波動<5%(通過 UPLC 檢測),且熱穩定性優異(Tm 值比普通株系高 2-3℃),更符合生物藥質量標準。
治療性抗體生產
重組蛋白藥物研發
細胞系工程與工藝優化
優勢:重組蛋白表達量顯著高于普通 CHO 亞型,工業化生產效率優勢明顯;兼容貼壁與懸浮培養,可根據生產規模靈活選擇培養模式;無血清化學限定培養基適應性強,降低血清來源的污染風險;遺傳穩定性優異,連續傳代 100 次后蛋白表達量波動<8%,保證生產批次一致性。
局限性:對部分含復雜糖基化修飾的蛋白(如某些細胞因子),糖型與人源組織存在細微差異,需通過糖基轉移酶工程改造優化;懸浮培養時聚集體過大(>100μm)可能影響傳質效率,需添加抗結塊劑調控;初始細胞系構建周期較長(約 3-4 個月),不適合快速篩選需求。
培養條件:懸浮培養推薦使用無血清化學限定培養基,添加 4mM 谷an酰胺與 1× 消泡劑,37℃、5% CO?環境中攪拌培養(轉速 110-130 rpm)。傳代時維持細胞密度在 3×10?-8×10?個 /mL,避免密度過低導致細胞凋亡。流加培養階段,可補加葡萄糖(維持濃度 3-5g/L)與氨基酸混合物,延長細胞對數生長期。
質控與安全:定期通過 STR 鑒定確認細胞身份,排除交叉污染;采用 ELISA 檢測目的蛋白表達量,確保穩定性;支原體檢測需為陰性,內毒素水平控制在 0.1EU/mL 以下。凍存使用含 10% DMSO 的無血清凍存液,梯度降溫后保存于液氮,復蘇后傳代 2-3 次待狀態穩定后用于生產,保證產品質量一致性。
以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。
產品咨詢
Copyright©2025 上海乾思生物科技有限公司 版權所有 備案號:滬ICP備2023041625號-7 sitemap.xml 技術支持:化工儀器網 管理登陸