L6大鼠骨骼肌成肌細胞系
L6大鼠骨骼肌成肌細胞系作為源自大鼠骨骼肌組織的成肌細胞模型，因保留完整的肌分化潛能，在骨骼肌發(fā)育、肌損傷修復及肌病機制研究中應用廣泛，成為探究成肌細胞增殖分化調控及肌肉相關疾病的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠骨骼肌原代成肌細胞，經永生化處理建立。細胞形態(tài)在增殖期呈長梭形，兩端鈍圓，排列呈平行束狀，胞質內可見少量肌絲結構；融合分化后形成多核肌管，肌管長度可達 200μm 以上，約 30% 細胞融合成管。生長方式為貼壁生長，具有接觸抑制特性，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數表現出成肌特征：倍增時間約 48 小時，處于增殖期的細胞活力旺盛；連續(xù)傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數 42 條）；成肌細胞標志物肌動蛋白（α-actin）、肌調節(jié)因子 MyoD 免疫熒光染色陽性率達 95%；分化期肌球蛋白重鏈（MHC）表達量較增殖期升高 8.3 倍；無細菌、真菌、支原體及病毒污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在肌分化機制研究中，L6 細胞在低血清誘導下，48 小時內開始出現融合，72 小時形成成熟肌管，分化率可達 70%，其中肌分化關鍵基因 Myogenin 表達量增加 6.2 倍，可模擬骨骼肌細胞從增殖到分化的完整過程，為解析肌分化的分子調控網絡提供理想模型。肌損傷修復研究方面，該細胞在胰島素樣生長因子 - 1（IGF-1）刺激下，增殖活性提升 45%，遷移能力增強 38%，肌管再生速度加快 2 倍，能很好地模擬體內肌衛(wèi)星細胞修復損傷的過程，助力肌損傷修復機制的探究。藥物篩選領域，該細胞對肌營養(yǎng)藥物反應敏感，經肌酸處理后，細胞內 ATP 含量增加 35%，肌管直徑增粗 20%，適用于評估肌營養(yǎng)藥物及肌病治療藥物的療效。此外，將該細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)，可構建體外肌損傷炎癥模型，用于研究炎癥微環(huán)境對肌修復的影響。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：增殖期推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。誘導分化時采用含 2% 馬血清的 DMEM 培養(yǎng)基，更換頻率為每 24 小時一次，誘導周期約 5-7 天。傳代時采用含 0.25% 胰dan白酶的消化液處理，37℃孵育 3-5 分鐘，待細胞間隙增大后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:3-1:4，每 3-4 天傳代一次，維持細胞融合度在 60%-70% 以保持增殖活性。凍存液配方為基礎培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 91% 以上，2-3 代內可恢復正常增殖分化能力。運輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁晃動培養(yǎng)瓶，防止細胞脫落。
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系以其穩(wěn)定的增殖分化能力、明確的成肌標志物表達及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢，在骨骼肌生物學研究與相關疾病藥物開發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示肌肉發(fā)育規(guī)律和開發(fā)肌病治療策略提供了可靠的實驗平臺。
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