HEC1B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
HEC1B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系自 1974 年從一位 61 歲女性的子宮內(nèi)膜癌組織成功分離后，便成為子宮內(nèi)膜癌研究領(lǐng)域的關(guān)鍵模型，尤其在激素依賴性腫瘤研究方面具有重要價(jià)值。
從細(xì)胞生物學(xué)特性來(lái)看，HEC1B 細(xì)胞呈典型的上皮樣形態(tài)，在顯微鏡下多為多邊形或立方體形，貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈現(xiàn)緊密的鋪路石狀排列。其具有較強(qiáng)的增殖能力，倍增時(shí)間約為 30 - 36 小時(shí)。細(xì)胞內(nèi)雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）呈陽(yáng)性表達(dá)，這種特性使其對(duì)激素刺激反應(yīng)敏感。當(dāng)培養(yǎng)基中加入 10 nM 雌激素時(shí)，雌激素與 ER 結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象變化，隨后轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核，激活 PI3K/Akt 和 MAPK 信號(hào)通路，使細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）活性提高 40%，進(jìn)而加速細(xì)胞從 G1 期向 S 期過(guò)渡，顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖。在侵襲轉(zhuǎn)移能力上，HEC1B 細(xì)胞表現(xiàn)突出，Transwell 實(shí)驗(yàn)顯示其穿過(guò) Matrigel 基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)量是正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞的 4 - 6 倍；劃痕愈合實(shí)驗(yàn)測(cè)得其傷口閉合速度為 45μm/h。將 HEC1B 細(xì)胞皮下接種到免疫缺陷小鼠體內(nèi)，8 - 12 天即可形成腫瘤，成瘤率約 85%，且部分腫瘤會(huì)發(fā)生肺部轉(zhuǎn)移，能夠較好地模擬臨床子宮內(nèi)膜癌的惡性進(jìn)展過(guò)程。此外，該細(xì)胞系對(duì)紫shan醇、shun鉑等常用hua療藥物存在一定耐藥性，為深入研究子宮內(nèi)膜癌耐藥機(jī)制提供了良好素材。
HEC1B 細(xì)胞的培養(yǎng)需嚴(yán)格把控條件。一般采用含 10% 胎牛血清（FBS）、1% 雙抗（青mei素 - 鏈mei素）的 MEM 培養(yǎng)基，F(xiàn)BS 中含有的胰島素樣生長(zhǎng)因子等成分，可協(xié)同促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。培養(yǎng)環(huán)境設(shè)置為 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí)，需用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 按 1:3 - 1:4 的比例進(jìn)行傳代，傳代周期約 4 - 5 天。新接種的細(xì)胞在 2 - 4 小時(shí)開始貼壁，12 小時(shí)內(nèi)基本完成貼壁。培養(yǎng)過(guò)程中，每 2 - 3 天需更換一次培養(yǎng)液，每天通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓、脫壁等異常現(xiàn)象，需及時(shí)排查是否存在污染或培養(yǎng)條件不適等問(wèn)題，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，以維持細(xì)胞的正常活性和狀態(tài)。
在科研與藥物研發(fā)領(lǐng)域，HEC1B 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在機(jī)制研究方面，研究發(fā)現(xiàn)微小 RNA - 125b 可通過(guò)靶向 Bcl - 2 基因，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn) HEC1B 細(xì)胞存活；長(zhǎng)鏈非編碼 RNA LncRNA - HOTAIR 與 PRC2 復(fù)合物結(jié)合后，能夠增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲能力。在藥物篩選實(shí)驗(yàn)中，該細(xì)胞系已用于驗(yàn)證多種抗癌藥物的療效，如芳香化酶抑制劑來(lái)qu唑在 HEC1B 細(xì)胞中的 IC??值為 20μM，可有效抑制細(xì)胞增殖；新型 PARP 抑制劑在 HEC1B 細(xì)胞荷瘤小鼠模型中，能使腫瘤體積縮小約 35%。此外，基于 HEC1B 細(xì)胞構(gòu)建的類器官模型，能更真實(shí)地模擬腫瘤三維微環(huán)境，有助于研究腫瘤細(xì)胞與周圍基質(zhì)的相互作用，為探索更有效的聯(lián)合治療方案提供了重要的研究平臺(tái)。不過(guò)，由于長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致 ER/PR 表達(dá)水平波動(dòng)，實(shí)驗(yàn)前需通過(guò) Western blot 檢測(cè)受體表達(dá)情況，并利用 STR 分型鑒定細(xì)胞系的遺傳穩(wěn)定性，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。
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