Hep-3B [Hep3B]人肝癌細胞系
Hep-3B [Hep3B]人肝癌細胞系源于人體肝細胞癌組織，是研究肝癌發生發展機制、開發抗癌藥物的重要模型。在顯微鏡下，Hep-3B 細胞呈現典型的上皮樣癌細胞形態，多為多邊形或不規則形，以貼壁方式生長于培養瓶底部，細胞間連接緊密，常堆疊形成多層細胞集落。細胞胞質豐富，經染色后呈嗜酸性，內部線粒體、內質網等細胞器異常發達，線粒體為癌細胞快速增殖提供充足能量，內質網則大量參與異常蛋白的合成與加工；細胞核大且深染，核質比例失調，核仁明顯且數目增多，部分細胞還可見多核及異常核分裂象，這些形態學特征直觀體現出其惡性腫瘤細胞的本質。
Hep-3B 細胞具有顯著的生物學特性。在增殖能力上，其細胞周期調控機制紊亂，Cyclin D1、CDK4 等蛋白高表達，促使細胞周期蛋白依賴性激酶持續活化，推動細胞快速從 G1 期進入 S 期，在適宜培養條件下，細胞倍增時間約為 24 - 36 小時。同時，Hep-3B 細胞中 Wnt/β-catenin、PI3K/AKT 等信號通路異常激活，Wnt/β-catenin 通路激活后，β-catenin 蛋白在細胞質中大量積累并轉入細胞核，啟動一系列與細胞增殖、侵襲相關基因的轉錄；PI3K/AKT 通路則抑制細胞凋亡，增強細胞代謝活性，進一步促進癌細胞的存活與增殖。在侵襲轉移方面，Hep-3B 細胞分泌基質金屬蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9 的能力較強，這些蛋白酶能夠高效降解肝組織細胞外基質中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分，破壞基底膜完整性；細胞表面整合素家族蛋白表達上調，增強細胞與細胞外基質的黏附與脫離能力，為癌細胞突破上皮屏障、發生遠處轉移創造條件。此外，Hep-3B 細胞對部分hua療藥物存在天然耐藥性，這種特性使其成為研究肝癌耐藥機制的理想對象。
培養 Hep-3B 人肝癌細胞系需遵循嚴格的操作規范。常用含 10% 優質胎牛血清的 DMEM 培養基作為基礎培養體系，胎牛血清中的生長因子、氨基酸等物質能充分滿足細胞生長和代謝需求；添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液，防止細菌污染。將細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養箱中，模擬人體生理環境，維持細胞內酸堿平衡與酶活性。當細胞匯合度達到 80% - 90% 時，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代，消化過程需在顯微鏡下實時觀察，避免過度消化損傷細胞，傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5。凍存時，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液，遵循程序降溫原則，先于 - 80℃冰箱過夜，再轉移至液氮中長期保存。在培養過程中，還需定期檢測細胞的生長狀態、基因型穩定性及耐藥相關蛋白表達情況，確保實驗結果的可靠性。
在科研應用領域，Hep-3B 細胞系成果豐碩。在肝癌發病機制研究中，科研人員借助該細胞系深入探究 TP53、CTNNB1 等基因突變與肝癌發生發展的關聯，發現 TP53 基因缺失與 Wnt/β-catenin 通路激活協同作用，顯著加速癌細胞的惡性轉化進程。在藥物研發方面，Hep-3B 細胞是篩選抗肝癌藥物的重要模型，新型的靶向 VEGFR 的小分子抑制劑、免疫檢查點抑制劑在該細胞系實驗中，能有效抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡；針對其耐藥特性開展的聯合用藥研究，也取得了顯著進展，為克服肝癌耐藥問題提供了新策略。此外，Hep-3B 細胞還用于評估肝癌的新型治療方案，如納米顆粒載藥系統、基因治療策略等，助力優化肝癌治療手段，推動肝癌診療技術不斷進步。
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