C2C12小鼠成肌細(xì)胞系
C2C12小鼠成肌細(xì)胞系源自小鼠胚胎的成肌細(xì)胞,經(jīng)體外分離、培養(yǎng)和篩選而建立。作為研究肌肉生物學(xué)的經(jīng)典細(xì)胞模型,它不僅具備良好的增殖能力,還能在特定條件下高效分化為肌管,為肌肉發(fā)育、肌wei縮疾病機(jī)制探索及相關(guān)藥物研發(fā)提供了有力支撐,在生命科學(xué)研究中占據(jù)重要地位。
在顯微鏡下,未分化的 C2C12 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的成纖維細(xì)胞樣形態(tài),呈貼壁生長,多為細(xì)長梭形或不規(guī)則多邊形,胞體伸展平鋪于培養(yǎng)器皿底部。細(xì)胞邊界清晰,胞質(zhì)豐富,內(nèi)含維持細(xì)胞旺盛代謝的細(xì)胞器;胞核大而圓,位于細(xì)胞中央,核仁明顯。細(xì)胞間緊密排列,相互接觸但不重疊,當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 70% - 80% 時,細(xì)胞開始自發(fā)啟動分化進(jìn)程。進(jìn)入分化階段后,細(xì)胞逐漸伸出偽足相互連接,多個細(xì)胞融合形成多核的肌管結(jié)構(gòu),這些肌管細(xì)長且呈繩索狀,是 C2C12 細(xì)胞向成熟肌肉細(xì)胞分化的重要標(biāo)志。此時若需傳代,通常按 1:3 - 1:5 的比例進(jìn)行,傳代周期約 2 - 3 天,以保證細(xì)胞活性和分化潛能。
培養(yǎng) C2C12 細(xì)胞需精準(zhǔn)控制培養(yǎng)環(huán)境。在增殖階段,常用培養(yǎng)基為含 10% 胎牛血清(FBS)的 DMEM 高糖培養(yǎng)基,高糖含量為細(xì)胞快速增殖提供充足能量,胎牛血清中的生長因子等活性成分則促進(jìn)細(xì)胞存活與分裂。將細(xì)胞置于 37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),穩(wěn)定的溫度和二氧化碳濃度維持培養(yǎng)基 pH 穩(wěn)定,為細(xì)胞營造適宜的生長環(huán)境。當(dāng)細(xì)胞準(zhǔn)備進(jìn)入分化階段時,需更換為含 2% 馬血清的 DMEM 培養(yǎng)基,馬血清可誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)肌分化相關(guān)基因,促使細(xì)胞融合形成肌管,培養(yǎng)過程中需定期更換培養(yǎng)基,清除代謝廢物,并通過顯微鏡密切觀察細(xì)胞形態(tài)變化。
C2C12 小鼠成肌細(xì)胞系在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在肌肉發(fā)育研究方面,科研人員通過調(diào)控細(xì)胞分化進(jìn)程,研究肌生成相關(guān)基因(如 MyoD、Myf5 等)的表達(dá)調(diào)控機(jī)制,探索肌肉細(xì)胞從成肌細(xì)胞向肌管、成熟肌纖維分化的分子路徑,為理解胚胎肌肉發(fā)育過程提供理論依據(jù)。在肌wei縮疾病研究中,該細(xì)胞系可用于模擬肌wei縮側(cè)索硬化癥、杜氏肌營養(yǎng)不良癥等疾病的病理過程,通過構(gòu)建疾病相關(guān)的基因敲除或過表達(dá)模型,研究疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制,尋找潛在治療靶點(diǎn)。此外,在藥物研發(fā)領(lǐng)域,C2C12 細(xì)胞系是篩選促進(jìn)肌肉生長、改善肌肉功能藥物的重要工具,科研人員將候選藥物作用于細(xì)胞,通過觀察細(xì)胞增殖、分化、肌管形成及相關(guān)蛋白表達(dá)變化,評估藥物療效,助力開發(fā)治療肌肉疾病的有效藥物。
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