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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1289CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細胞系

CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細胞系
產品型號:BY-1289
簡要描述:

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詳細介紹

CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細胞系
CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細胞系是基因工程與生物制藥領域的里程碑式細胞模型,因缺失二氫ye酸還原酶(dhFr)而得名。作為野生型 CHO 細胞的衍生株,其du特的代謝缺陷與基因擴增能力,使其成為重組蛋白高表達的 “黃金宿主",在生物藥研發與生產中占據核心地位。
一、細胞基本特性
  • 來源與形態:該細胞系源自中國倉鼠卵巢細胞(CHO),通過化學誘變篩選獲得 dhFr 基因缺陷株。體外培養時呈上皮樣形態,貼壁生長,細胞呈多邊形或短梭形,排列均勻,邊緣清晰。在 37℃、5% CO?的培養環境中,增殖穩定,傳代周期約 2-3 天,可適應貼壁培養或懸浮培養,尤其適合無血清培養基體系。

  • 遺傳特征:保留 CHO 細胞的非整倍體核型(染色體數目約 20-22 條),核心特征是 dhFr 基因功能缺失 ——dhFr 是相關代謝關鍵酶,缺失后細胞無法自主合成胸苷和嘌呤,必須依賴培養基中的外源性次黃piao呤和胸苷才能存活(即 HT 營養缺陷型)。這一特性使其成為基因擴增的理想工具:當外源基因與 dhFr 基因共轉染后,在特定抗代謝藥物壓力下,dhFr 基因會與外源基因共同擴增,從而顯著提高目標蛋白的表達量。

二、核心應用領域
  1. 重組蛋白高表達平臺

CHO/dhFr?細胞的核心價值在于其基因擴增能力。通過將外源基因(如抗體、細胞因子等)與 dhFr 基因串聯導入細胞,可利用特定抗代謝藥物進行階梯式篩選:該藥物會抑制殘留 dhFr 活性,迫使細胞通過基因擴增增加 dhFr 拷貝數以抵抗藥物壓力,同時帶動外源基因同步擴增(拷貝數可達數百甚至數千),最終實現目標蛋白的超高表達。這一機制使其成為單克隆抗體、重組人血清白蛋白等生物藥的主流生產細胞系,表達量可高達 10-15g/L,遠超普通細胞模型。
  1. 基因工程藥物研發

在新藥研發中,該細胞系用于構建穩定表達株,評估候選藥物的理化性質與生物活性。例如,在單克隆抗體研發中,通過轉染抗體輕重鏈基因,利用 dhFr / 特定抗代謝藥物系統篩選高表達克隆,可快速獲得具有臨床潛力的細胞株。其優勢在于:表達的重組蛋白可進行復雜的翻譯后修飾(如糖基化、磷酸化),與人類蛋白修飾模式高度一致,保證藥物的生物活性與安全性。
  1. 代謝工程與合成生物學研究

因其代謝缺陷明確,CHO/dhFr?細胞常被用于相關代謝通路研究,或通過基因編輯改造代謝網絡,優化蛋白表達效率。例如,敲除細胞中的凋亡相關基因,可提高細胞在高密度培養中的存活率;過表達糖基轉移酶,能優化重組蛋白的糖型,降低免疫原性。
三、優勢與局限性
  • 優勢:具有強大的基因擴增能力,可顯著提高外源蛋白表達量;能對蛋白進行正確的翻譯后修飾,產物活性接近天然蛋白;培養適應性強,可通過懸浮培養規模化生產,滿足工業級需求;且無內源性病毒污染,生物安全性高,被 FDA 等監管機構廣泛認可。

  • 局限性:基因擴增過程耗時較長(需數月階梯式篩選),且特定抗代謝藥物壓力可能導致細胞基因組不穩定;部分復雜蛋白的表達仍受限于細胞自身的修飾能力(如某些特殊糖型無法合成);培養成本較高,需嚴格控制特定抗代謝藥物濃度與培養基成分。

四、培養與注意事項
  • 培養條件:基礎培養基需添加次黃piao呤和胸苷(HT 補充劑)以滿足營養需求;若用于基因擴增,需在培養基中加入特定抗代謝藥物(濃度從 0.01μM 逐步提升至 1μM 以上)。生產階段可改用化學成分明確的無血清培養基,減少外源污染物,便于下游純化。

  • 污染防控:貼壁細胞易受支原體污染,需定期通過 PCR 檢測;凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液,液氮保存可長期維持活性,復蘇時快速解凍并離心去除 DMSO,避免細胞損傷。

五、研究意義

CHO/dhFr?細胞系的出現徹di改變了生物制藥行業的格局:它解決了重組蛋白表達量低的瓶頸問題,推動了單克隆抗體等生物藥從實驗室走向臨床。目前,全球 70% 以上的重組蛋白藥物由該細胞系或其衍生株生產,包括治療癌癥的部分單抗藥物、治療類風濕關節炎的阿達木單抗等重磅藥物。其技術原理也為其他細胞系的改造提供了范式,成為連接基因工程與產業化的關鍵橋梁,持續推動生物藥向高效、安全、低成本方向發展。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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