HB BFR 87-70小鼠雜交瘤細胞系
HB BFR 87-70小鼠雜交瘤細胞系是單克隆抗體制備與免疫檢測領域的重要細胞模型，憑借穩定的特異性抗體分泌能力、精準的抗原識別特性及良好的體外培養適應性，在生物分子檢測、疾病診斷及免疫學基礎研究中發揮重要作用，為單克隆抗體的研發與應用提供了可靠的細胞資源。
來源與背景：該細胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合篩選，通過經典雜交瘤技術克隆獲得。其建立過程是將經特定抗原免疫的小鼠 B 淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞融合，經多輪篩選和克隆化培養，得到能持續分泌針對靶抗原的單克隆抗體的細胞株。這一細胞系的成功構建，解決了多克隆抗體成分復雜、特異性不足的問題，為獲取均一性高、靶向性強的抗體提供了有效途徑，自建立以來，在免疫檢測標準化研究中占據重要地位。
細胞特性：形態上呈現典型的雜交瘤細胞特征，貼壁生長時呈上皮樣，多為多邊形，細胞質豐富，細胞核大而圓，核質比約 1:2.5，約 7% 的細胞可見雙核結構，體現融合細胞的形態特點。核心特性突出：抗體分泌穩定高效，分泌量達 11-17μg/10?細胞 / 24h，連續傳代 59 次后分泌能力僅下降 6%，穩定性優于多數同類細胞系；抗原結合特異性高，與靶抗原的結合常數（Kd）達 10??M 級別，與同源抗原交叉反應率 < 0.7%，確保檢測結果的準確性；增殖能力穩健，體外培養倍增時間約 49-55 小時，克隆形成率 43%，腹腔接種 BALB/c 小鼠后，10-16 天可形成腹水，腹水中抗體濃度達 5-9mg/ml，便于批量制備抗體。傳代采用常規方法處理，傳代比例 1:3-1:4，細胞密度達 70%-75% 時需及時傳代，過度密集會導致抗體分泌量下降 14% 左右。
培養條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基，添加 1% 雙抗，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關鍵培養要點：血清質量關鍵，需使用低內毒素胎牛血清（<0.3EU/ml），劣質血清會使細胞活力降低 24%，抗體分泌量減少 29%；無血清培養適配性較好，在無血清培養基中添加適量胰島素、轉鐵蛋白等成分，可維持細胞生長，抗體純度提升至 95% 以上，簡化純化流程；腹水制備規范，小鼠腹腔預先注射降植烷 7 天后，接種 1.3×10?個細胞，11-17 天收集腹水，每只小鼠可獲 4-7ml 腹水，腹水經純化后抗體活性保持穩定。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 48 小時貼壁率達 81%，抗體分泌功能恢復 86% 以上。
檢測鑒定：經微生物檢測，無細菌、真菌、支原體污染，符合雜交瘤細胞質量標準。抗體亞型鑒定為 IgG2a 型，輕鏈為 κ 型；通過 ELISA、免疫印跡等方法驗證，能特異性結合靶抗原，無交叉反應。染色體核型分析顯示染色體數目 85-95 條，融合親本細胞染色體特征，符合雜交瘤細胞遺傳學特性。功能驗證中，該抗體用于免疫組化檢測時，能特異性識別組織中的靶抗原，陽性信號清晰，背景干擾低，證實其應用可靠性。
應用領域：在生物分子檢測中，基于該細胞系抗體開發的 ELISA 試劑盒，檢測靈敏度達 0.35ng/ml，線性范圍寬，適用于血清、組織樣本中靶抗原的定量分析；在疾病診斷試劑研發方面，其抗體構建的免疫熒光探針，可用于病理切片中靶抗原的可視化檢測，診斷符合率達 91%。在免疫學研究中，可用于抗原表位分析，通過肽掃描實驗確定抗原的特異性結合區域，為疫苗設計提供關鍵信息。此外，該細胞系可用于優化抗體生產工藝，通過懸浮培養參數調整，抗體產量可提升 1.5-2.1 倍，降低規模化生產的成本。
與其他雜交瘤細胞系相比，HB BFR 87-70 的優勢在于抗體分泌穩定性強、傳代壽命較長，且在不同培養條件下抗體的特異性變化較小，適合標準化抗體的生產。通過該細胞系的應用，已開發出多種免疫檢測試劑盒，廣泛應用于臨床診斷與科研實驗，為免疫檢測技術的發展及相關疾病的精準診斷提供了重要支持。
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