SHG-44人膠質(zhì)瘤細胞系
SHG-44人膠質(zhì)瘤細胞系在攻克惡性腦腫瘤的艱難征程中,作為關鍵的研究模型,為探索膠質(zhì)瘤的發(fā)病機制與治療策略開辟了重要路徑。該細胞系源自人腦膠質(zhì)瘤組織,憑借其du特的生物學特性,在基礎科研與臨床轉(zhuǎn)化領域發(fā)揮著不可替代的作用。
從生物學特性來看,SHG-44 細胞呈現(xiàn)梭形或不規(guī)則星形,貼壁生長時細胞形態(tài)豐富多變,細長的突起相互交織,賦予其較強的遷移能力,仿佛在模擬腫瘤細胞在腦實質(zhì)中的浸潤擴散。其增殖速率可觀,在理想培養(yǎng)條件下,倍增時間約為 24 - 30 小時。在分子層面,SHG-44 細胞攜帶諸多驅(qū)動腫瘤發(fā)展的基因變異。IDH1 基因突變是其顯著特征之一,該突變致使異檸檬酸脫氫酶 1 的活性改變,異常代謝產(chǎn)物 2 - 羥基戊二酸(2-HG)大量積累,引發(fā)表觀遺傳修飾紊亂,干擾細胞正常分化與增殖調(diào)控,促使腫瘤細胞持續(xù)增殖。同時,p53 基因突變在 SHG-44 細胞中也極為常見,p53 蛋白無法正常履行 “基因組守護者" 職責,細胞周期檢查點失控,DNA 損傷無法及時修復,細胞凋亡受阻,加速腫瘤惡化進程。此外,PI3K-AKT 和 MAPK 信號通路在 SHG-44 細胞中呈持續(xù)激活狀態(tài),前者通過抑制促凋亡蛋白活性,增強細胞存活能力;后者則驅(qū)動細胞增殖、遷移,助力腫瘤細胞突破腦組織屏障。SHG-44 細胞分泌的 MMP-2、MMP-9 等基質(zhì)金屬蛋白酶,能高效降解細胞外基質(zhì),為腫瘤細胞侵襲擴散掃清障礙。
在細胞培養(yǎng)與維護方面,SHG-44 細胞需在添加 10% 胎牛血清、1% 雙抗的 DMEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng),以滿足其營養(yǎng)需求并維持無菌環(huán)境。將細胞置于 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,保持 pH 值在 7.2 - 7.4 之間。當細胞匯合度達 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 進行消化,需嚴格把控消化時間,避免細胞損傷,傳代比例一般為 1:3 - 1:5。為確保細胞活性和生物學特性穩(wěn)定,實驗優(yōu)先選用 20 代以內(nèi)的低代次細胞,并定期通過細胞形態(tài)學觀察、MTT 法檢測細胞活力、流式細胞術分析細胞周期和凋亡情況等手段監(jiān)測細胞狀態(tài),及時做好低溫凍存工作。
SHG-44 細胞系在科研與醫(yī)學領域成果豐碩。在基礎研究中,科研人員運用 CRISPR/Cas9 技術敲低 SHG-44 細胞的 IDH1 突變基因,發(fā)現(xiàn)細胞增殖顯著受抑,且出現(xiàn)向正常神經(jīng)膠質(zhì)細胞分化的趨勢,進一步明確了 IDH1 突變在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的關鍵作用。在藥物研發(fā)方面,SHG-44 細胞是篩選抗膠質(zhì)瘤藥物的重要模型,傳統(tǒng)hua療藥替mo唑胺、新型靶向藥針對特定基因突變的抑制劑,以及新興的免yi治療藥物如 CAR-T 細胞療法相關制劑,均在此細胞系上完成初期藥效評估;通過誘導細胞耐藥,研究人員發(fā)現(xiàn) ABCC2 轉(zhuǎn)運蛋白過表達與多藥耐藥密切相關,為克服臨床耐藥提供了新思路。在腫瘤免yi治療研究中,將 SHG-44 細胞與 NK 細胞、樹突狀細胞共培養(yǎng),可有效評估免疫細胞對膠質(zhì)瘤細胞的殺傷效果;將其原位移植到免疫缺陷小鼠腦內(nèi)構建的動物模型,能高度模擬腫瘤在體內(nèi)的發(fā)生發(fā)展過程,為新型治療策略的臨床前驗證提供可靠數(shù)據(jù)支持。
盡管 SHG-44 細胞系貢獻巨大,但其應用也存在局限。作為永生化細胞系,其基因表達譜與原發(fā)腫瘤存在差異,且體外培養(yǎng)難以wan全還原腦內(nèi)復雜的腫瘤微環(huán)境。不過,隨著類器官技術、單細胞測序和 3D 生物打印技術的發(fā)展,未來將 SHG-44 細胞與前沿技術結合,有望構建更貼近體內(nèi)真實情況的研究模型,推動膠質(zhì)瘤診療邁向精準化新時代。
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