構建背景：CIAPIN1 是調控細胞存活與應激響應的關鍵因子，該細胞系通過慢病毒載體介導將人 CIAPIN1 基因導入 BHK-21 細胞（敘利亞倉鼠腎上皮細胞），經嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得高表達株，“CIAPIN1+" 代表穩定過表達該基因的細胞群體，確保蛋白表達的均一性與穩定性。

形態與增殖：體外培養呈典型上皮樣形態，貼壁生長，細胞呈多邊形或短梭形，排列緊密，形態與親本 BHK-21 細胞一致。在 37℃、5% CO?條件下，傳代周期約 18-24 小時，增殖速度快于普通 BHK-21 細胞，可適應含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基，兼容貼壁與懸浮培養，高密度培養（細胞密度達 2×10?個 /mL）時仍能維持活性，適合大規模功能實驗。

表達特征：CIAPIN1 主要定位于細胞質，表達量是親本細胞的 5-8 倍（通過 Western blot 定量），長期傳代（＞30 代）后表達量波動＜12%。蛋白分子量約 34kDa，與天然 CIAPIN1 的分子量一致，且能與特異性抗體結合，功能上保留其抗凋亡活性 —— 經凋亡誘導劑處理后，細胞存活率比親本 BHK-21 高 40%-50%。

優勢：CIAPIN1 表達穩定，避免瞬時轉染的表達波動；功能特異性高，僅強化 CIAPIN1 相關通路，減少其他基因干擾；增殖速度快，實驗周期短，適合大規模篩選；保留 BHK-21 細胞的病毒敏感性，可同時研究基因功能與病毒相互作用，應用場景多元。

局限性：長期培養需維持嘌呤霉素篩選壓力（2μg/mL），否則易丟失表達載體；CIAPIN1 過表達可能輕微改變細胞代謝（如葡萄糖攝取增加），實驗設計中需設置親本細胞對照；作為倉鼠細胞系，其信號通路與人類細胞存在差異，結果外推至人體時需結合人源細胞驗證。

培養條件：基礎培養基為含 10% 胎牛血清、2μg/mL 嘌呤霉素的 MEM，添加抗菌劑防污染。傳代時采用細胞刮分離，貼壁培養融合度控制在 70%-80%，避免過度密集導致接觸抑制。進行凋亡實驗時，建議使用無血清培養基同步化細胞 24 小時，以減少血清成分對結果的干擾。

功能檢測方法：驗證 CIAPIN1 活性可采用流式細胞術檢測凋亡率（Annexin V/PI 雙染），或 Western blot 檢測下游抗凋亡蛋白（如 Bcl-2）的表達變化；研究通路激活時，推薦檢測磷酸化 Akt（p-Akt）的水平，以量化 CIAPIN1 的功能活性。

凍存與復蘇：凍存液含 10% DMSO、2μg/mL 嘌呤霉素的wan全培養基，液氮保存可維持活性 3 年以上；復蘇時 37℃快速解凍，離心去除 DMSO 后用含篩選壓力的培養基重懸，傳代 1 次后即可用于實驗，確保細胞狀態穩定。