MCF 7B人乳腺癌細(xì)胞系
MCF 7B人乳腺癌細(xì)胞系是研究激素依賴性乳腺癌的重要模型，憑借穩(wěn)定的雌激素受體表達(dá)和典型的乳腺上皮特征，在乳腺癌發(fā)病機制、激素治療及藥物研發(fā)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，為解析乳腺癌的激素依賴特性提供了可靠工具。
來源與背景：該細(xì)胞系衍生自 MCF-7 細(xì)胞系的亞克隆，于 20 世紀(jì) 70 年代從一名 69 歲女性患者的乳腺腺癌組織中分離建立。與親代 MCF-7 細(xì)胞相比，其雌激素依賴性更強，激素受體表達(dá)更穩(wěn)定，尤其適合研究雌激素信號通路在乳腺癌中的作用機制，為探索乳腺癌從激素敏感型向耐藥型轉(zhuǎn)化的過程提供了理想樣本，填bu了乳腺癌激素依賴亞型研究模型的空白。作為 ER 陽性乳腺癌的經(jīng)典模型，其生物學(xué)特性與臨床激素受體陽性乳腺癌患者高度吻合，是連接基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的重要橋梁。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈上皮樣，細(xì)胞排列緊密呈鋪路石樣，部分區(qū)域形成腺管樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見分泌顆粒，細(xì)胞核圓形或橢圓形，核仁明顯，具有乳腺腺癌的典型形態(tài)特征。核心特性為強雌激素依賴性，增殖和存活依賴雌激素（如 17β- 雌二醇），雌激素剝奪會顯著抑制其生長，高表達(dá)雌激素受體 α（ERα）和孕激素受體（PR），ER 信號通路激活可誘導(dǎo)乳腺珠蛋白（MGB1）等靶基因表達(dá)；激素敏感性，對他mo昔芬等抗雌激素藥物反應(yīng)顯著，藥物處理后細(xì)胞增殖抑制率可達(dá) 70% 以上，長期藥物暴露可誘導(dǎo)耐藥亞株形成，模擬臨床治療中的耐藥現(xiàn)象；中等增殖速率，體外培養(yǎng)時細(xì)胞倍增時間約 48-56 小時，克隆形成率約 45%，在裸鼠模型中需 6-8 周形成可觸及的腫瘤，成瘤組織能維持 ER 表達(dá)，對雌激素刺激呈明顯增殖反應(yīng)。傳代時采用常規(guī)消化液處理，傳代比例 1:4-1:6，連續(xù)傳代 50 次后仍能保持 ERα 和 PR 的穩(wěn)定表達(dá)，但長期雌激素剝奪可能導(dǎo)致受體表達(dá)下調(diào)。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸、1mM 丙酮酸鈉和 2mM 谷an酰胺以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 3-4 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 20%-70% 之間，過度匯合會導(dǎo)致細(xì)胞極性喪失及激素受體表達(dá)下降。與其他乳腺癌細(xì)胞系不同，其對血清中雌激素含量敏感，實驗中常使用活性炭處理的胎牛血清（去除內(nèi)源性類固醇激素）構(gòu)建激素剝奪模型，傳代時用常規(guī)消化液處理 3-4 分鐘，輕柔吹打以保護腺管樣結(jié)構(gòu)，防止劇烈操作破壞細(xì)胞間連接。
檢測鑒定：經(jīng)微生物篩查，無支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染，符合實驗細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫組織化學(xué)檢測顯示，ERα、PR 呈強陽性表達(dá)，細(xì)胞角蛋白 19（CK19）陽性，符合乳腺腺癌的分子特征。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型，存在 1q 擴增、8p 缺失等異常，與臨床 ER 陽性乳腺癌患者的遺傳學(xué)改變高度吻合。功能驗證實驗中，經(jīng) 17β- 雌二醇處理后，細(xì)胞增殖速率提高 2.5 倍，ERα 靶基因 pS2 的 mRNA 表達(dá)上調(diào) 8-10 倍；他mo昔芬處理可使細(xì)胞周期停滯于 G1 期，凋亡率升高至 25% 以上，驗證其激素依賴特性和藥物敏感性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在激素機制研究中，該細(xì)胞系常用于解析 ERα 信號通路的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，研究發(fā)現(xiàn) ERα 與共激活因子（如 SRC-1）結(jié)合后可促進下游靶基因轉(zhuǎn)錄，表觀遺傳修飾（如組蛋白乙酰化）參與這一調(diào)控過程，為理解雌激素如何驅(qū)動乳腺癌細(xì)胞生長提供了關(guān)鍵線索。在耐藥機制研究中，是探索抗雌激素藥物耐藥的常用模型，通過構(gòu)建他mo昔芬耐藥亞株發(fā)現(xiàn)，ERα 突變、PI3K/Akt 通路激活及 ABC 轉(zhuǎn)運蛋白過表達(dá)是主要耐藥機制，為開發(fā)逆轉(zhuǎn)耐藥的策略提供實驗依據(jù)。在藥物篩選方面，適用于評估新型抗乳腺癌藥物的療效，尤其是選擇性 ER 降解劑（如氟維司群）的篩選，通過檢測藥物對細(xì)胞增殖及 ERα 表達(dá)的影響，篩選能有效阻斷激素信號的候選藥物，部分新型化合物對耐藥亞株仍有顯著抑制作用。此外，該細(xì)胞系可用于研究腫瘤微環(huán)境與激素信號的交叉調(diào)控，與乳腺成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)可增強其雌激素敏感性，為解析微環(huán)境對乳腺癌進展的影響提供實驗基礎(chǔ)。
該細(xì)胞系的du特優(yōu)勢在于能穩(wěn)定模擬 ER 陽性乳腺癌的激素依賴特性和藥物反應(yīng)性，為研究 “雌激素 - ERα- 靶基因" 軸的功能提供了理想模型。通過與三陰性乳腺癌細(xì)胞系（如 MDA-MB-231）的對比實驗，可清晰區(qū)分不同乳腺癌亞型的生物學(xué)差異，為個性化治療策略的制定提供實驗依據(jù)。
總之，MCF 7B 人乳腺癌細(xì)胞系憑借其典型的激素依賴特征和穩(wěn)定的生物學(xué)特性，成為研究激素敏感性乳腺癌的重要工具，為解析乳腺癌的發(fā)病機制、開發(fā)新型抗雌激素藥物及優(yōu)化臨床治療方案提供了堅實的實驗基礎(chǔ)。
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