肺特異性標志物與修復因子：高表達肺部特異性標志物，如表面活性蛋白 A（SP-A，陽性率 97%）、 Clara 細胞分泌蛋白（CCSP，陽性率 96%），其 SP-A 在損傷后表達量可提升 4 倍（SEP-K1 無此特性）；分泌角質細胞生長因子（KGF）和轉化生長因子 -β（TGF-β），其中 KGF 含量達 40pg/10?細胞 / 天，能促進肺上皮細胞遷移（遷移速率是靜止期細胞的 2.3 倍），模擬肺部損傷后的修復啟動過程，與小耳豬肺損傷組織的功能一致性達 90%。

屏障功能與代謝特性：具有完整的肺上皮屏障功能，跨上皮電阻（TEER）值達 450Ω?cm2（顯著高于 SEP-K1），緊密連接蛋白 occludin 和 claudin-18 表達豐富；能分泌表面活性物質（含量達 12μg/10?細胞 / 天），維持肺泡表面張力，其氧氣交換相關酶活性與小耳豬肺組織高度吻合，可模擬肺部氣體交換的基礎代謝過程。

病毒敏感性譜：對呼吸道病毒（如 PRRSV）的感染效率達 98%，感染后 48 小時出現典型細胞病變（細胞融合、空泡化），病毒滴度達 10?.? TCID??/mL（是 SEP-K1 細胞的 9 倍）；因高表達 PRRSV 受體 CD163，對肺部靶向病毒的吸附效率顯著高于腎細胞系，尤其適合肺相關病毒病研究。

急性肺損傷模型：通過該細胞系發現脂多糖（LPS）可激活 TLR4/MyD88 通路，使炎癥因子 TNF-α 表達量提升 5 倍，SP-A 表達下降 60%，與小耳豬急性肺損傷的病理特征一致性達 93%（SEP-K1 模型無法模擬），揭示 “炎癥 - 屏障破壞" 的肺部病變軸。

修復信號調控機制：在 KGF 干預實驗中，細胞遷移速率提升 70%，凋亡率下降 55%，其下游 ERK 通路磷酸化水平增加 3 倍，證實 KGF 在肺損傷修復中的關鍵作用，為清肺藥物研發提供靶點。

PRRSV 致肺損傷機制：利用其肺部特異性，發現 PRRSV 可抑制 SP-A 功能（下降 50%），導致肺泡表面張力異常，同時誘導炎癥小體 NLRP3 激活，使 IL-1β 分泌增加 4 倍，與 PRRSV 感染仔豬的肺間質炎癥程度正相關（R2=0.92），研究結果較 SEP-K1 模型更接近在體狀態。

抗病du藥物篩選：建立基于病毒復制抑制率的高通量模型，某干擾素誘導劑可使 SEP-L2 細胞的 PRRSV 滴度下降 10?倍，且對細胞毒性較低（CC??/EC??比值達 25），小耳豬實驗顯示該藥物可降低肺部病毒載量 70%，證實模型的應用價值。

清肺藥物活性檢測：在 LPS 致肺損傷模型中，某中藥提取物可使細胞 SP-A 表達恢復 70%，TEER 值回升至正常水平的 85%，與小耳豬肺功能指標（動脈血氧分壓上升 40%）的改善一致性達 90%（SEP-K1 模型僅 58%）。

肺部毒性評價：作為獸藥肺毒性篩選的標準細胞系，其對氨基糖苷類抗生素的敏感性與小耳豬在體毒性的相關性達 92%，可在 72 小時內完成藥物安全劑量評估，較動物實驗成本降低 65%。

培養基：DMEM/F12 培養基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL KGF，pH 維持在 7.2-7.4；為增強肺部功能模擬，可添加 10nM 地塞mi松，使 SP-A 表達量提升 30%。

傳代流程：當細胞融合度達 70% 時，按 1:3 比例接種（低于 SEP-K1 的 1:4 比例），離心速度 800rpm，24 小時貼壁率超 92%，避免過度融合（＞80% 會導致屏障功能下降）。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養基，細胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達 89%，需檢測 SP-A 表達確認功能穩定。

肺損傷模型構建：細胞接種 24 孔板，用 1μg/mL LPS 處理 24 小時，檢測 IL-8 釋放量（較正常組增加 4 倍）和 TEER 值下降幅度，結果變異系數＜7%；SEP-K1 對照組用于對比器官特異性差異。

病毒感染實驗：接種 PRRSV（MOI=0.1）后，37℃培養 48 小時，通過 RT-PCR 檢測病毒 RNA 拷貝數（可達 10? copies/mL），適合抗病du藥物療效評估。

優勢：

局限性：