STB-S2三葉小蹄蝠皮膚細胞系
STB-S2三葉小蹄蝠皮膚細胞系在三葉小蹄蝠皮膚生物學研究領域具有不可替代的重要意義，為深入探究三葉小蹄蝠皮膚細胞的特性與功能提供了穩定可靠的體外研究工具，助力科研人員系統剖析三葉小蹄蝠皮膚的發育機制、屏障功能及相關病理過程，為該物種的保護與研究奠定了關鍵基礎。
三葉小蹄蝠作為棲息于洞穴、巖縫等陰暗環境的翼手目動物，其皮膚系統進化出了顯著的適應能力。在潮濕的洞穴環境中，需維持皮膚的屏障功能以防止水分過度滲透；在群體棲息時，又要抵御微生物的侵襲，同時其皮膚還需適應飛行時的摩擦與拉伸。皮膚細胞作為這些功能的核心執行者，其生理特性與三葉小蹄蝠的生存策略緊密相連。以往對三葉小蹄蝠皮膚的研究多局限于整體動物解剖觀察，難以在細胞層面解析屏障功能的分子調控網絡，而原代皮膚細胞培養存在存活期短、傳代后功能衰減等問題，嚴重制約了研究深度。STB-S2 細胞系的建立，恰好解決這一研究空白。
STB-S2 三葉小蹄蝠皮膚細胞系源自健康成年三葉小蹄蝠的背部皮膚組織，通過原代培養與特異性純化技術構建而成。建立過程嚴格遵循無菌操作規范：在超凈工作臺內獲取皮膚組織后，精細剝離皮下脂肪與毛囊結構，選取富含成纖維細胞的真皮層區域，將組織切割為 1mm3 的勻質小塊；用含雙抗的磷酸鹽緩沖液反復沖洗 5-6 次，去除殘留血液與雜質；加入含消化酶的專用分散液，在 37℃恒溫水浴中消化 35 分鐘，期間每 10 分鐘輕柔吹打以確保細胞充分分離；經 70μm 濾網過濾去除組織碎屑后，1000r/min 離心 8 分鐘收集細胞，用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養液重懸，接種于預包被明膠的培養瓶中，置于 37℃、5% CO?培養箱中培養。初期每日更換培養液以淘汰非貼壁細胞，待細胞匯合度達 80% 時采用 0.25% 消化酶 - EDTA 混合液消化傳代。目前該細胞系已穩定傳代 46 代，經臺盼藍染色檢測，細胞活力持續保持在 90% 以上。
該細胞系呈現典型的成纖維樣形態特征：細胞呈長梭形，胞體舒展，平均長度約 48μm，寬度約 8μm，排列呈放射狀或漩渦狀；胞質豐富，可見大量的粗面內質網與膠原纖維，經 Masson 染色顯示胞質內有藍色膠原顆粒；細胞核呈橢圓形，位于細胞中央，核質比約 1:5，具有穩定的貼壁生長特性。生長動力學研究表明，STB-S2 細胞在 DMEM/F12 培養液中表現最佳，較 MEM 培養液增殖速率提升 25%；最適培養溫度為 37℃，偏離 1℃即導致增殖率下降 12%；10% 胎牛血清濃度下群體倍增時間最短，為 67 小時，血清濃度降至 5% 時倍增時間延長至 96 小時。連續傳代 30 代后，細胞形態無明顯變異，核型分析顯示染色體數目穩定，與三葉小蹄蝠體細胞一致，證實其遺傳背景穩定。
功能特性研究顯示，STB-S2 細胞高表達皮膚成纖維細胞特異性標志物：波形蛋白（Vimentin）陽性率 98%，Ⅰ 型膠原蛋白（ColⅠ）分泌量達 34μg/10?cells/24h，成纖維細胞特異性蛋白 1（FSP-1）表達強度顯著高于上皮細胞系。該細胞具有活躍的基質合成功能，能大量分泌膠原纖維、彈性纖維等細胞外基質成分，在三維培養體系中可形成類似真皮的網狀結構。環境適應實驗表明，當暴露于高濕度環境時，細胞內水通道蛋白 3（AQP3）的表達量在 7 小時內上調 4.1 倍，黏多糖合成相關酶的活性增加 3.4 倍，體現出對潮濕環境的快速響應機制。模擬機械刺激后，肌動蛋白重組相關基因的表達量升高 3.6 倍，細胞外基質金屬蛋白酶的活性增強 2.7 倍，提示存在活躍的應激修復過程。
在應用價值方面，STB-S2 細胞系已成為多個研究領域的關鍵工具：在皮膚生理學中，通過 RNA 干擾技術沉默 ColⅠ 基因后，細胞的基質支撐能力顯著下降，證實該蛋白在皮膚結構維持中的核心作用；比較生理學研究發現，與其他蝙蝠物種皮膚細胞相比，STB-S2 細胞的抗菌肽基因基礎表達量高 2.3 倍，揭示其洞穴環境適應的分子基礎；在獸醫學領域，該細胞系已用于篩選蝙蝠皮膚感染相關藥物，發現特定抗真菌藥物在 2μmol/L 濃度時可抑制 79% 的真菌生長，且對細胞毒性低于部分同類藥物。
作為永生化三葉小蹄蝠皮膚細胞系，STB-S2 不僅為該物種的皮膚生物學研究提供了標準化模型，其特殊的生存環境適應機制研究還可為翼手目動物比較生理學提供新視角，在野生動物保護、皮膚疾病模型構建等領域具有重要的科研與應用價值。
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