9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系作為穩(wěn)定表達(dá) lacZ 基因的大鼠腦腫瘤細(xì)胞模型，因兼具膠質(zhì)肉瘤的惡性生物學(xué)特性與可追蹤的報告基因功能，在腦腫瘤侵襲機制、基因治療及藥物遞送研究中具有du特jia值，成為探究中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤的重要實驗工具。
細(xì)胞特性與來源背景：該細(xì)胞系源自 9L 大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞經(jīng) lacZ 基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染構(gòu)建，通過 G418 篩選獲得單克隆細(xì)胞株。細(xì)胞形態(tài)呈多形性，主要為梭形和星形，胞體直徑約 15-30μm，胞質(zhì)豐富，可見嗜酸性顆粒，約 12% 細(xì)胞呈現(xiàn)多核現(xiàn)象，細(xì)胞核大而畸形，核質(zhì)比顯著增高，核仁明顯。生長方式為貼壁生長，部分細(xì)胞呈懸浮狀態(tài)，無接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達(dá) 88%。核心參數(shù)表現(xiàn)出重組細(xì)胞特征：倍增時間約 30 小時，連續(xù)傳代 50 次后染色體核型不穩(wěn)定（染色體數(shù)約 54-58 條）；膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vimentin）免疫熒光陽性率分別為 91% 和 96%，lacZ 基因表達(dá)穩(wěn)定，X-gal 染色陽性率達(dá) 98%；具有ji強的侵襲能力，Transwell 實驗中穿膜細(xì)胞數(shù)是正常膠質(zhì)細(xì)胞的 5.3 倍；無微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 97%，保障實驗結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價值：在腦腫瘤侵襲機制研究中，9L/lacZ 細(xì)胞經(jīng)表皮生長因子（EGF）刺激后，基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）活性增加 4.8 倍，侵襲能力提升 3.6 倍，結(jié)合 lacZ 基因的可視化追蹤，可清晰觀察到細(xì)胞在腦切片中的遷移路徑，為解析膠質(zhì)肉瘤的腦內(nèi)侵襲模式提供理想模型。
基因治療研究方面，該細(xì)胞作為報告基因模型，在腺相關(guān)病毒（AAV）介導(dǎo)的基因遞送實驗中，lacZ 表達(dá)量增加 6.2 倍，轉(zhuǎn)染效率達(dá) 75%，可直觀評估基因治療載體的靶向性和效率。在藥物篩選領(lǐng)域，該細(xì)胞對替mo唑胺處理敏感，24 小時后細(xì)胞活力下降 45%，β- 半乳糖苷酶活性與細(xì)胞存活狀態(tài)呈線性相關(guān)，可通過比色法快速評估藥物療效，篩選效率提升 40%。
此外，將該細(xì)胞立體定向接種于大鼠腦內(nèi)，7 天后形成可通過 X-gal 染色定位的腫瘤灶，21 天后腫瘤體積達(dá) 0.8cm3，成瘤率 100%，且腫瘤侵襲范圍與 lacZ 陽性區(qū)域高度一致，為體內(nèi)評估抗腫瘤藥物的穿透性和靶向性提供可靠模型。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養(yǎng)基，添加 400μg/ml G418、2mM 谷an酰胺及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 1-2 天更換一次，維持 G418 選擇壓力以確保 lacZ 基因穩(wěn)定表達(dá)。傳代時，采用細(xì)胞刮除法收集貼壁細(xì)胞，輕柔吹打制成單細(xì)胞懸液，傳代比例 1:4-1:6，每 2-3 天傳代一次，避免細(xì)胞聚團影響活性。
凍存液配方為培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，細(xì)胞濃度調(diào)整為 8×10?個 /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 90% 以上，2 代內(nèi)可恢復(fù) lacZ 基因的穩(wěn)定表達(dá)。運輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運輸，收到細(xì)胞后需立即更換含 G418 的新鮮培養(yǎng)基，靜置培養(yǎng) 24 小時后觀察細(xì)胞狀態(tài)，X-gal 染色驗證 lacZ 表達(dá)正常后方可進行實驗。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全二級防護要求。
9L/lacZ 大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系以其穩(wěn)定的報告基因表達(dá)、典型的膠質(zhì)肉瘤惡性表型及高效的可追蹤特性，在腦腫瘤研究與基因治療開發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示腦腫瘤的侵襲機制和評估新型治療策略提供了可靠的可視化研究平臺。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請聯(lián)系我們。
首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-12509L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
