產(chǎn)品系統(tǒng)PRODUCT CENTER
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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-ZYM-SVEC01豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系


廠家實(shí)力
Manufacturer Strength
有效保修
Valid Warranty
質(zhì)量保障
Quality Assurance產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細(xì)介紹
來源與建立背景
形態(tài)與生長特征
功能特性
靜脈特異性標(biāo)志物與功能蛋白:高表達(dá)靜脈內(nèi)皮特異性標(biāo)志物,如 EphB4(陽性率 96%)、血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-cadherin,陽性率 94%),其 EphB4 表達(dá)量是 PIEC 細(xì)胞的 4 倍,是靜脈表型的關(guān)鍵分子;同時(shí)表達(dá)組織型纖溶酶原激活物(t-PA,陽性率 90%)和血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM,陽性率 88%),抗凝功能活性顯著高于 PIEC 細(xì)胞(t-PA 分泌量達(dá) 12μg/10?細(xì)胞 / 天,是 PIEC 的 2.5 倍),能模擬靜脈內(nèi)皮的抗凝優(yōu)勢。
血管生成與屏障功能:在 Matrigel 基質(zhì)上 48 小時(shí)內(nèi)形成分支較少的管狀結(jié)構(gòu),管腔直徑較 PIEC 細(xì)胞大 30%(模擬靜脈血管特征),血管生成速率雖慢于 PIEC 細(xì)胞,但對(duì)缺氧的敏感性更高(缺氧條件下 VEGF 分泌量提升 6 倍);體外構(gòu)建的內(nèi)皮屏障跨上皮電阻(TEER)值達(dá) 150Ω?cm2,通透性高于 PIEC 細(xì)胞,符合靜脈內(nèi)皮的生理特征。
病原體敏感性:對(duì)豬圓環(huán)病毒 2 型、豬流行性腹瀉病毒等具有高度敏感性,豬圓環(huán)病毒 2 型感染后 72 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(胞質(zhì)內(nèi)包涵體、細(xì)胞聚集成團(tuán)),病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL,且病毒可通過靜脈內(nèi)皮細(xì)胞向周圍組織擴(kuò)散,模擬病毒在靜脈系統(tǒng)的播散過程。
靜脈疾病機(jī)制研究
深靜脈血栓模型:在低血流剪切力(5 dyn/cm2)條件下,ZYM-SVEC01 細(xì)胞的血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子 1(PECAM-1)表達(dá)量下降 40%,凝xue酶生成量增加 3 倍,同時(shí)纖維蛋白沉積明顯,模擬深靜脈血栓形成的早期病理變化,其血栓形成相關(guān)指標(biāo)與豬體內(nèi)模型的一致性達(dá) 90%,顯著高于 PIEC 細(xì)胞系。
靜脈瓣膜功能研究:通過該細(xì)胞系研究靜脈瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞的特性,發(fā)現(xiàn)瓣膜區(qū)細(xì)胞的 EphB4 表達(dá)量是非瓣膜區(qū)的 2 倍,且對(duì)剪切力的耐受性更強(qiáng),為靜脈瓣膜功能不全的機(jī)制解析提供關(guān)鍵模型。
抗病毒研究與疫苗開發(fā)
病毒靜脈嗜性研究:利用其對(duì)豬圓環(huán)病毒 2 型的敏感性,發(fā)現(xiàn)病毒通過結(jié)合細(xì)胞表面的硫suan軟骨素 A 進(jìn)入細(xì)胞,感染后可使靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 t-PA 分泌量下降 60%,抗凝功能受損,揭示病毒導(dǎo)致靜脈血栓的分子機(jī)制。
疫苗效力評(píng)價(jià):作為豬流行性腹瀉病毒疫苗的效力檢測細(xì)胞系,其病毒中和試驗(yàn)結(jié)果與仔豬攻毒保護(hù)率一致性達(dá) 85%,較 PIEC 細(xì)胞提升 10%,被用于評(píng)估疫苗對(duì)腸道靜脈內(nèi)皮的保護(hù)效果。
藥物研發(fā)與安全性評(píng)價(jià)
抗靜脈血栓藥物篩選:基于其抗凝功能特性建立高通量藥物篩選體系,日均可檢測 150 種化合物。篩選出的新型 t-PA 激活劑可使 ZYM-SVEC01 細(xì)胞的纖溶活性提升 2 倍,在動(dòng)物模型中能顯著溶解已形成的靜脈血栓,為深靜脈血栓治療提供候選藥物。
靜脈毒性評(píng)價(jià):用于評(píng)估藥物對(duì)靜脈內(nèi)皮的損傷,某靜脈注射hua療藥物在該模型中的半數(shù)毒性濃度(TC??)與豬體內(nèi)靜脈炎發(fā)生率的相關(guān)性達(dá) 88%,顯著高于 PIEC 細(xì)胞系,為藥物靜脈毒性早期評(píng)價(jià)提供可靠工具。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基:DMEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4;為促進(jìn)靜脈表型維持,可添加 10ng/mL 血管內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C),使 EphB4 表達(dá)量提升 35%。
傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 70% 時(shí),消化處理后按 1:5 比例接種,離心速度 800rpm,24 小時(shí)貼壁率超 95%,避免過度融合(>80% 會(huì)導(dǎo)致靜脈特異性功能下降)。
凍存保護(hù):采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基,細(xì)胞密度 1.5×10?個(gè) /mL,程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮,復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘,接種至預(yù)涂纖維連接蛋白的培養(yǎng)瓶,存活率可達(dá) 90%。
功能實(shí)驗(yàn)操作
靜脈血管生成檢測:細(xì)胞以 4×10?個(gè) / 孔接種至 Matrigel 包被的 24 孔板,培養(yǎng) 48 小時(shí)后通過 ImageJ 軟件定量分析管腔直徑與分支數(shù)(靜脈血管特征為大管腔、少分支),結(jié)果變異系數(shù)<10%。
抗凝功能檢測:采用發(fā)色底物法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清中 t-PA 活性,或通過凝xue酶原時(shí)間(PT)檢測評(píng)估細(xì)胞表面抗凝物質(zhì)的活性,與豬靜脈組織的相關(guān)性達(dá) 85%。
優(yōu)勢:
靜脈內(nèi)皮特異性:是唯yi能穩(wěn)定模擬豬靜脈內(nèi)皮功能的細(xì)胞系,靜脈標(biāo)志物表達(dá)與抗凝功能顯著優(yōu)于 PIEC 等動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞系,為靜脈疾病研究提供專屬模型。
疾病模型精準(zhǔn)度高:在深靜脈血栓等靜脈疾病模擬中的生理相關(guān)性達(dá) 90%,遠(yuǎn)高于通用內(nèi)皮細(xì)胞系,被國際靜脈學(xué)會(huì)列為推薦模型。
與動(dòng)脈細(xì)胞系互補(bǔ):與 PIEC 細(xì)胞系形成血管研究的完整體系,可同時(shí)模擬動(dòng)脈與靜脈的差異功能,為血管系統(tǒng)整體研究提供便利。
局限性:
血管類型局限:源自腸系膜靜脈,對(duì)大靜脈(如下腔靜脈)功能的模擬有限,需結(jié)合不同部位靜脈細(xì)胞系使用。
傳代穩(wěn)定性較差:連續(xù)傳代超過 80 代后靜脈特異性標(biāo)志物表達(dá)下降 15%,需嚴(yán)格控制傳代次數(shù)以保持功能穩(wěn)定。
培養(yǎng)成本較高:對(duì)纖維連接蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)依賴性強(qiáng),培養(yǎng)成本是 PIEC 細(xì)胞的 1.3 倍,限制大規(guī)模應(yīng)用。
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