ITH6.1樹鼩肝細胞永生化細胞系
ITH6.1樹鼩肝細胞永生化細胞系在樹鼩肝臟生物學研究領域占據重要地位，為深入探究樹鼩肝細胞的特性與功能提供了可靠的體外研究工具，助力科研人員剖析樹鼩肝臟的生理與病理機制。
樹鼩作為一種在進化上接近靈長類的小型哺乳動物，其肝臟在物質代謝、解毒防御以及維持機體穩態等方面發揮著關鍵作用。肝細胞作為肝臟結構與功能的基本單位，其生理特性與樹鼩的生存適應和健康狀態緊密相關。以往對樹鼩肝臟的研究多依賴整體動物實驗，難以在細胞層面精準解析肝臟的代謝規律和疾病發生機制。原代肝細胞培養存在存活周期短、功能穩定性差、傳代受限等問題，制約了相關研究的深入開展。因此，ITH6.1 樹鼩肝細胞永生化細胞系的建立，為突破這些研究瓶頸提供了新的解決方案。
ITH6.1 樹鼩肝細胞永生化細胞系來源于樹鼩的肝臟組織，通過導入特定永生化基因處理后建立而成。建立過程嚴格遵循細胞培養規范，在無菌條件下獲取樹鼩肝臟組織，仔細剝離結締組織和血管，將肝臟組zhi剪切成約 1mm3 的小塊。隨后，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液多次沖洗，徹di清除血液和雜質。接著，加入專用肝細胞分散液，在 37℃環境中處理 20-30 分鐘，期間每隔 7 分鐘輕柔吹打，促使細胞充分分散。收集細胞懸液后，經 70μm 細胞濾網過濾，再以 1000r/min 的轉速離心 8 分鐘，棄去上清液，用含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培養液重懸細胞，接種于培養瓶中，放置在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱內進行原代培養。培養初期，每 24 小時更換培養液以去除非貼壁細胞，當細胞匯合度達到 80% 左右時進行傳代操作。目前，該細胞系已穩定傳代至 55 代以上，細胞活力始終保持在 85% 以上。
該細胞系呈現典型的上皮樣形態，細胞呈多邊形，胞體飽滿，排列緊密呈鋪路石樣，胞質豐富且含有細小顆粒，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，具有較強的貼壁生長特性。在生長特性方面，研究發現 ITH6.1 細胞在 DMEM 培養液中生長狀態最佳，相較于其他培養液，細胞增殖速度提高約 22%。最適宜的培養溫度為 37℃，與多數哺乳動物體溫一致；當胎牛血清濃度為 10% 時，細胞群體倍增時間最短，約為 52 小時。歷經 45 代傳代后，細胞形態和增殖速率未出現明顯變化，核型分析顯示其染色體數目穩定，維持樹鼩正常的染色體數目，遺傳背景可靠，穩定保留了肝細胞的固有特性。
在功能特性方面，免疫熒光檢測清晰顯示，ITH6.1 細胞高表達肝細胞特異性標志物，如白蛋白、細胞角蛋白 18，確鑿證實了其肝細胞屬性。該細胞系具備完善的代謝功能，能高效參與糖、脂、蛋白質等物質的合成與分解，對藥物和外源性化合物的代謝能力穩定，在模擬肝臟的物質轉化過程中發揮著重要作用。當 ITH6.1 細胞受到化學毒物刺激時，解毒相關基因如 CYP3A 的表達量顯著上調，展現出良好的應激響應能力，為研究樹鼩肝臟的解毒機制提供了關鍵線索。此外，該細胞系對常見的肝臟病原體表現出敏感性，感染后細胞活力下降，炎癥因子如 TNF-α、IL-6 的分泌量增加，為探究病原體與肝細胞的相互作用機制提供了良好的實驗材料。
ITH6.1 樹鼩肝細胞永生化細胞系在多個研究領域展現出廣泛的應用價值。在肝臟發育研究中，通過對該細胞系進行基因編輯實驗，成功揭示了 HNF4α 基因在樹鼩肝細胞分化過程中的關鍵調控作用。在比較生理學研究方面，借助該細胞系與其他動物肝細胞系的對比分析，清晰闡明了不同物種肝臟代謝功能的差異及其調控機制。在醫學研究領域，基于該細胞系建立的藥物篩選模型，已用于評估多種藥物的肝毒性和代謝途徑，為肝臟疾病的藥物研發提供了有力支持。
作為穩定可靠的樹鼩肝細胞模型，ITH6.1 不僅為樹鼩肝臟生物學研究提供了重要的技術支撐，推動了相關學術研究的深入發展，還有助于提升對樹鼩這種模式生物的研究水平，為人類肝臟疾病的研究和治療提供了有價值的參考，在基礎研究和臨床應用領域均具有重要意義。
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