H-4-II-E大鼠肝細胞瘤細胞系
H-4-II-E大鼠肝細胞瘤細胞系作為源自大鼠肝臟惡性腫瘤的細胞模型，因保留典型肝癌生物學特征，在肝臟腫瘤發病機制與藥物研發領域應用廣泛，成為探究肝細胞癌惡性增殖、轉移及耐藥性的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠肝癌組織，經原代培養和克隆化建立。細胞形態呈上皮樣，多為多邊形或不規則形，胞質內可見脂滴空泡，約占細胞總數的 15%，細胞核大而畸形，核仁明顯，核質比顯著升高，約 30% 細胞呈現多核現象。生長方式為貼壁生長，排列疏松，無明顯接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達 90%。核心參數表現出腫瘤特征：倍增時間約 48 小時，連續傳代 50 次后仍保持異常染色體核型（染色體數約 44-46 條）；肝癌相關標志物甲胎蛋白（AFP）、熱休克蛋白 70（HSP70）免疫熒光染色陽性率達 93%，白蛋白分泌量僅為正常肝細胞的 35%；無細菌、真菌、支原體及病毒污染，細胞純度達 96%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在肝癌增殖機制研究中，H-4-II-E 細胞高表達細胞周期蛋白 Cyclin E，其 mRNA 水平較正常肝細胞升高 3.2 倍，經絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）抑制劑處理后，增殖活性下降 58%，可模擬肝癌細胞異常增殖的分子過程，為解析癌變信號通路提供理想模型。腫瘤轉移研究方面，該細胞在 Transwell 實驗中穿膜細胞數是正常肝細胞的 8.7 倍，基質金屬蛋白酶 - 9（MMP-9）分泌量增加 4.3 倍，經整合素抗體干預后轉移能力降低 62%，能很好地模擬肝癌侵襲轉移特性，助力轉移相關基因功能的探究。藥物篩選領域，該細胞對不同抗腫瘤藥物敏感性存在差異，經相關藥物處理后凋亡率差異顯著（18%-45%），適用于評估抗腫瘤藥物的療效及耐藥機制。此外，將細胞與肝星狀細胞共培養，可構建體外肝癌微環境模型，用于研究腫瘤微環境對肝癌進展的影響。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基，添加 1% 非必需氨基酸、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次，避免代謝廢物堆積。傳代時采用含 EDTA 的消化液處理，37℃孵育 5-7 分鐘，待細胞邊緣回縮后加入含血清的培養基終止消化，傳代比例為 1:3-1:5，每 3-4 天傳代一次，維持細胞融合度在 70%-80% 以保持腫瘤特性。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 88% 以上，2-3 代內可恢復正常增殖能力。運輸采用干冰凍存管或 T-25 培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需嚴格遵循腫瘤細胞生物安全規范。
H-4-II-E 大鼠肝細胞瘤系以其穩定的惡性表型、明確的分子特征及易于培養的優勢，在肝癌基礎研究與藥物開發中發揮著重要作用，為揭示肝臟腫瘤的發病機制和開發新型靶向治療策略提供了可靠的實驗平臺。
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