ITH48永生化滇西亞種樹鼩肝細胞系
ITH48永生化滇西亞種樹鼩肝細胞系在樹鼩肝臟生物學研究領域有著重要地位，為深入探究滇西亞種樹鼩肝細胞的特性與功能提供了可靠的體外研究工具，助力科研人員揭開樹鼩肝臟的諸多奧秘。
滇西亞種樹鼩作為一種分布于特定區域的小型哺乳動物，其肝臟在物質代謝、解毒以及維持機體穩態等方面發揮著關鍵作用。肝細胞作為肝臟結構與功能的基本單位，其特性與滇西亞種樹鼩的生存和健康緊密相關。以往對樹鼩肝臟的研究多依賴整體動物實驗，難以在細胞層面精準解析肝臟的生理與病理機制。原代肝細胞培養存在存活時間短、功能不穩定、傳代困難等問題，限制了相關研究的深入開展。因此，ITH48 永生化滇西亞種樹鼩肝細胞系的建立，為突破這些研究瓶頸帶來了新的可能。
ITH48 永生化滇西亞種樹鼩肝細胞系來源于滇西亞種樹鼩的肝臟組織，通過特定的永生化技術處理后建立而成。建立過程嚴格遵循細胞培養規范，在無菌條件下獲取滇西亞種樹鼩的肝臟組織，仔細去除結締組織和血管，將肝臟組zhi剪切成約 1mm3 的小塊。隨后，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液多次沖洗，以徹di清除血液和雜質。接著，加入專用肝細胞分散液，在 37℃的環境中處理 25-35 分鐘，期間每隔 8 分鐘輕柔吹打，促使細胞充分分散。收集細胞懸液后，經 70μm 細胞濾網過濾，再以 1000r/min 的轉速離心 8 分鐘，棄去上清液，用含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培養液重懸細胞，并接種于培養瓶中，放置在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱內進行原代培養。在培養初期，每 24 小時更換培養液以去除非貼壁細胞，當細胞匯合度達到 80% 左右時進行傳代操作。目前，該細胞系已穩定傳代至 50 代以上，細胞活力始終保持在 85% 以上。
該細胞系呈現典型的上皮樣形態，細胞呈多邊形，胞體飽滿，排列緊密呈鋪路石樣，胞質豐富，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，具有較強的貼壁生長特性。在生長特性方面，研究發現 ITH48 細胞在 DMEM 培養液中生長狀態最為理想，相較于其他培養液，其細胞增殖速度提高約 20%。最適宜的培養溫度為 37℃，與多數哺乳動物體溫一致；當胎牛血清濃度為 10% 時，細胞群體倍增時間最短，約為 55 小時。歷經 40 代傳代后，細胞形態和增殖速率未出現明顯變化，核型分析顯示其染色體數目穩定，維持滇西亞種樹鼩正常的染色體數目，遺傳背景可靠，穩定保留了肝細胞的固有特性。
在功能特性方面，免疫熒光檢測清晰顯示，ITH48 細胞高表達肝細胞特異性標志物，如白蛋白、細胞角蛋白 18，確鑿證實了其肝細胞屬性。該細胞系具備較強的代謝功能，能參與多種物質的合成與分解，對葡萄糖、脂肪等的代謝能力穩定，在維持機體的能量平衡中發揮著重要作用。當 ITH48 細胞受到化學毒物刺激時，解毒相關基因如 CYP450 的表達量顯著上調，展現出良好的應激反應能力，為研究滇西亞種樹鼩肝臟的解毒機制提供了關鍵線索。此外，該細胞系對常見的肝臟病原體表現出敏感性，感染后細胞活力下降，炎癥因子分泌增加，為深入探究病原體與肝細胞的相互作用機制提供了良好的實驗材料。
ITH48 永生化滇西亞種樹鼩肝細胞系在多個研究領域展現出廣泛的應用價值。在肝臟發育研究中，通過對該細胞系進行基因編輯實驗，成功揭示了相關基因在滇西亞種樹鼩肝細胞分化過程中的關鍵調控作用。在比較生理學研究方面，借助該細胞系與其他動物肝細胞系的對比分析，清晰闡明了不同動物肝臟功能的差異及其調控機制。在醫學研究領域，基于該細胞系建立的藥物篩選模型，已用于評估多種藥物對肝臟細胞的影響，為肝臟疾病的防治提供了有力支持。
作為穩定可靠的滇西亞種樹鼩肝細胞模型，ITH48 不僅為樹鼩肝臟生物學研究提供了重要的技術支撐，推動了相關學術研究的深入發展，還有助于提升對滇西亞種樹鼩的研究水平，為該物種的保護和相關領域的研究貢獻重要力量。
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