LS 174T人結直腸腺癌細胞系
LS 174T人結直腸腺癌細胞系源自男性結腸腺癌患者的腫瘤組織，于 20 世紀 70 年代初被成功建立。在顯微鏡下觀察，其細胞呈現典型的上皮樣形態，細胞相互連接，形成緊密的單層或簇狀結構，細胞大小和形態存在一定差異，這種異質性與人體結直腸腺癌腫瘤組織的細胞特征高度相似。其核型為超二倍體，存在多個染色體畸變，同時攜帶多種關鍵基因突變，例如 KRAS 基因突變、p53 通路相關基因缺失等，這些遺傳特征不僅賦予細胞惡性增殖的能力，也為腫瘤研究提供了豐富的靶點。
HCT - 15 細胞的培養需特定且精細的條件。常用 RPMI - 1640 培養基，添加 10% 優質胎牛血清和 1% 雙抗，以滿足細胞生長所需營養，維持無菌環境。其中，胎牛血清富含細胞生長必需的生長因子、激素、結合蛋白等物質，能有效促進細胞貼壁和增殖；雙抗則防止細菌和真菌污染，保障細胞健康生長。培養環境為 37℃、5% 二氧化碳與 95% 空氣的混合氣體，濕度保持在 70% - 80%。37℃模擬人體體溫，5% 二氧化碳可維持培養基的 pH 穩定，適宜的濕度避免培養基過快蒸發。
細胞貼壁生長，當匯合度達 80% - 90% 時需傳代。傳代使用 0.25％（w/v）胰dan白酶 - 0.53mM EDTA 消化，由于細胞貼壁較緊，消化時間相對較長，約 1 - 2 分鐘。在消化過程中，需在顯微鏡下密切觀察細胞形態變化，當細胞變圓、間隙增大時，及時終止消化，避免過度消化損傷細胞。若出現消化困難的情況，可適當提高胰dan白酶濃度或延長消化時間，但需格外注意觀察。消化后，需迅速加入含血清的培養基中和胰dan白酶活性，防止殘留胰dan白酶繼續作用。傳代比例一般為 1:2 - 1:4 ，傳代后需定期更換培養基，保證細胞有充足的營養供應。凍存時，凍存液采用 90% 胎牛血清加 10% 二甲基亞砜，按 4℃ 10 分鐘、-20℃ 2 小時、-80℃過夜后轉至液氮的程序保存，每一步降溫都能減少細胞內冰晶形成，保護細胞活性。值得注意的是，復蘇細胞時，需將凍存管迅速放入 37℃水浴中快速解凍，以減少低溫對細胞的損傷。若復蘇后細胞活力不佳，可嘗試降低傳代密度，給予細胞更寬松的生長環境。
在科學研究中，HCT - 15 細胞系應用廣泛。利用該細胞系構建的耐藥模型，如 HCT - 15/5FU 細胞系，是研究氟尿*啶耐藥機制的重要工具。研究發現，HCT - 15/5FU 細胞的耐藥涉及胸苷酸合成酶上調、二氫嘧啶脫氫酶活性增強、藥物外排與解毒系統激活等多個方面。通過對 HCT - 15 細胞的研究，不僅能深入探索腫瘤發生發展機制，還能進行抗癌藥物篩選、評估藥物療效。例如，在前沿研究中，科研團隊將新型免疫檢查點抑制劑與傳統hua療藥物聯合作用于 HCT - 15 細胞，觀察到兩者協同作用顯著增強了對癌細胞的殺傷效果，為結直腸癌的免疫 - hua療聯合治療策略提供了理論依據。還有研究團隊運用 HCT - 15 細胞測試新型納米靶向藥物，該藥物能夠精準識別并作用于癌細胞表面的特定受體，相比傳統藥物，其對 HCT - 15 細胞的抑制效果更好且副作用更小。此外，通過基因編輯技術對 HCT - 15 細胞的特定基因進行敲除或過表達，可探究基因在腫瘤發展中的功能，從而發現新的治療靶點，為結直腸癌的臨床治療提供更多潛在方向。
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