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首頁-技術文章-β淀粉樣蛋白1-42ELISA試劑盒(循環酶法)

β淀粉樣蛋白1-42ELISA試劑盒(循環酶法)

更新時間:2018-10-08      點擊次數:597

β淀粉樣蛋白1-42ELISA試劑盒 (循環酶法)

標準品的稀釋原則: 2 瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至 1ml ,蓋好后靜置 10 分鐘以上,然后反復顛倒 / 搓動以助溶解,其濃度為 300 pg/ml ,做系列倍比稀釋后,分別稀釋 300 pg/ml , 150 pg/ml , 75 pg/ml , 37.5 pg/ml , 18.5 pg/ml , 9 pg/ml , 4.5 pg/ml ,樣品稀釋液直接作為標準濃度 0 pg/ml ,臨用前 15 分鐘內配制。 如配制 150 pg/ml 標準品:取 0.5ml (不要少于 0.5ml ) 300 pg/ml 的上述標準品加入含 0.5ml 樣品稀釋液的 Eppendorf 管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則: 臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實際配制時應多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 生物素標記抗體加 990 μ l 生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則: 臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實際配制時應多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 辣根過氧化物酶標記親和素加 990 μ l 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

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細胞凋亡發生時,內源性核酸內切酶將分解核小體區間的雙鏈DNA,但核小體本身由于由組蛋白緊密結合而免受切割,單克隆抗體可以與核小體形成夾心結構,可通過檢測核小體判斷細胞是否經歷凋亡事件。 ●原理:●細胞凋亡的發生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp~200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結構,可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。

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編輯:小檀20181008

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