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技術(shù)資訊
一、關(guān)鍵步驟組織取材與處理取材于胃組織肌層,需剝離黏膜、外膜及結(jié)締組織,保留中層環(huán)形肌。用含雙抗的PBS清洗3次,去除血污及雜質(zhì)。若懷疑污染,可置于含青鏈霉素的混合液中浸泡30~60分鐘。組織塊剪切與消化將組織剪成1mm3小塊,采用兩步消化法:先加0.2%膠原酶-Ⅱ于37℃消化1小時(shí),待組織呈絮狀后,再加0.25%胰蛋白酶消化15~30分鐘,期間每隔10分鐘搖動(dòng)一次。消化后通過(guò)200目濾網(wǎng)過(guò)濾,收集濾液。細(xì)胞接種與培養(yǎng)濾液1000rpm離心5分鐘,棄上清,用含15%FBS的D...
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C6/36蚊子細(xì)胞是病毒學(xué)研究中常用的昆蟲(chóng)細(xì)胞系之一,特別是在研究蚊媒病毒方面有著廣泛應(yīng)用。由于其對(duì)多種蚊媒病毒的高效感受性、易于培養(yǎng)和穩(wěn)定的特性,成為了病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的重要工具。以下是C6/36蚊子細(xì)胞在病毒學(xué)研究中的主要應(yīng)用。一、病毒培養(yǎng)與病毒學(xué)研究被廣泛用于蚊媒病毒的培養(yǎng)與擴(kuò)增,尤其是那些需要蚊子細(xì)胞作為培養(yǎng)基的病毒。與哺乳動(dòng)物細(xì)胞系不同,它對(duì)蚊媒病毒有更高的敏感性,因此,它們常用于研究病毒在蚊子體內(nèi)的復(fù)制機(jī)制、感染途徑和病毒的傳播方式。例如,廣泛用于登革熱病毒(DEN...
11-11
SF9昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞是昆蟲(chóng)細(xì)胞系中廣泛使用的一種模型,特別是在基因表達(dá)、疫苗開(kāi)發(fā)、病毒研究以及免疫學(xué)等領(lǐng)域。SF9細(xì)胞來(lái)源于美洲大蠟蚧的卵巢組織,因其適應(yīng)性強(qiáng)、易于培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染而被廣泛用于分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究。盡管昆蟲(chóng)缺乏類脊椎動(dòng)物那樣的特異性免疫反應(yīng),但它們依然有一套有效的免疫反應(yīng)機(jī)制來(lái)抵抗病原體。SF9昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞的免疫反應(yīng)主要依賴其體液免疫和細(xì)胞免疫的基本機(jī)制,尤其是在病毒感染、抗菌反應(yīng)等方面。其免疫反應(yīng)機(jī)制主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:(1)模式識(shí)別受體(PRRs)昆蟲(chóng)的...
11-8
在無(wú)血清培養(yǎng)基中實(shí)現(xiàn)BHK-21細(xì)胞的高密度培養(yǎng),是生物制藥領(lǐng)域提升重組蛋白或病毒疫苗產(chǎn)量的關(guān)鍵。該過(guò)程面臨營(yíng)養(yǎng)成分限制、代謝副產(chǎn)物積累及細(xì)胞凋亡等多重挑戰(zhàn)。成功策略需圍繞培養(yǎng)基優(yōu)化、工藝控制與代謝管理展開(kāi)。一、培養(yǎng)基的精準(zhǔn)優(yōu)化與補(bǔ)料策略無(wú)血清培養(yǎng)基缺乏血清的保護(hù)和營(yíng)養(yǎng)緩沖作用,因此必須進(jìn)行精細(xì)化設(shè)計(jì)。基礎(chǔ)培養(yǎng)基優(yōu)化:商用無(wú)血清培養(yǎng)基是起點(diǎn),但常需根據(jù)特定BHK-21細(xì)胞亞克隆及表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行個(gè)性化調(diào)整。關(guān)鍵點(diǎn)包括:確定葡萄糖、谷氨酰胺等核心能源和碳源的最佳起始濃度;補(bǔ)充足夠的...
10-20
小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的固有免疫細(xì)胞,起著關(guān)鍵的免疫監(jiān)視和防御作用。它們起源于胚胎期的卵黃囊,并在神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中遷移到大腦和脊髓。作為神經(jīng)系統(tǒng)的“免疫衛(wèi)兵”,小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)炎癥中的作用尤其重要,它們不僅參與免疫應(yīng)答,還與神經(jīng)損傷、神經(jīng)退行性疾病以及神經(jīng)發(fā)育過(guò)程密切相關(guān)。小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)炎癥中的作用,主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:一、炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)與維持當(dāng)神經(jīng)系統(tǒng)遭受外來(lái)刺激(如感染、創(chuàng)傷或毒性物質(zhì))時(shí),能夠通過(guò)其表面受體識(shí)別損傷信號(hào),啟動(dòng)免疫反應(yīng)。受體如Toll樣受體...
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